如要从少量(0.5-10 mL)样品中纯化抗体,推荐使用Amicon® Pro纯化系统。这款装置采用离心技术,在纯化、缓冲液置换和浓缩时无需对样品进行转移或稀释,因此可尽量降低损失抗体的风险。下列方法通过配置protein A/G琼脂糖树脂的Amicon® Pro系统,专门开发用于0.5 mL样品的抗体亲和纯化。
兔血清(货号S20-100ML)的IgG通过配置蛋白A或蛋白G琼脂糖的Amicon® Pro系统(10kDa MWCO,货号ACK5010PA和ACK5010PG)或传统的离心柱纯化。接着将纯化获得的IgG进行缓冲液置换和浓缩,该过程在同一Amicon® Pro装置中进行,或从离心柱中转移至Amicon® Ultra浓缩管中进行。
使用Amicon® Pro系统的过程只需要6次移液/离心,而使用传统离心柱和浓缩管的过程需要11次移液/离心。如下图所示,抗体回收率不变。
使用Amicon® Pro系统和传统离心柱的兔血清来源抗体纯化(n=3)
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