通过与罗氏合作，我们很高兴为罗氏 Digital LightCycler^® System 提供定制引物、标准（3’-淬灭）探针、内淬灭探针和双淬灭（内淬灭和3’-淬灭）探针。

• 订购引物
• 订购标准探针
• 索取内淬灭探针
• 索取双淬灭探针
• dPCR技术论文中的标准探针

数字PCR是终点PCR方法，用于绝对定量和针对相似多数序列背景所分析的少数序列，例如体细胞突变的定量。 罗氏Digital LightCycler^® System (图 1) 支持无细胞DNA/肿瘤学、基因表达/绝对定量和拷贝数量变 异/NIPT应用，分别具有高灵敏度（20,000个分区）、通用（28,000个分区）和高分辨率（100,000个分区）设置。

如下性能参数表明，我们的引物和探针经过广泛测试，证明完全适配该数字PCR平台。

产品优势

• 引物
  • 取您所需：各种规模、纯化方法等
  • 改善锁核酸杂交特异性
• 标准探针
  • 序列特异性设计简单
  • 广泛的报告/淬灭基团组合
• 内淬灭探针
  • 设计更长的探针
  • 广泛的报告/淬灭基团组合
• 双淬灭探针
  • 设计更长的探针
  • 信噪比好
  • 更适合检测挑战性靶标

如果您的需要不同于在此所给的通用规格，请发送邮件至 dnaoligos@merckgroup.com进行咨询。

性能参数

罗氏研发部门在 Digital LightCycler^® System 上测试了标准探针、内淬灭探针和双淬灭探针检测。参数如下：

• 人类DNA靶标 (图 2 和 3)
  • EIF5B (内含子 1)
    • 扩增子：112 bp
    • 正向引物GGCCGATAAATTTTTGGAAATG
    • 反向引物GGAGTATCCCCAAAGGCATCT
    • 标准探针[6FAM]TTCAGCCTTCTCTTCTCATGCAGTTGTCAG[BHQ1]
    • 内淬灭探针[6FAM]TTCAGCCTT[BHQ2]CTCTTCTCATGCAGTTGTCAG
    • 双淬灭探针[6FAM]TTCAGCCTT[BHQ2]CTCTTCTCATGCAGTTGTCAG[BHQ1]
  • HER2 (外显子 7)
    • 扩增子：112 bp
    • 正向引物CTCATCGCTCACAACCAAGT
    • 反向引物GGTCTCCATTGTCTAGCACG
    • 标准探针[HEX]ACCCAGCTCTTTGAGGACAACTATGC[BHQ1]
    • 内淬灭探针[HEX]ACCCAGCTC[BHQ2]TTTGAGGACAACTATGC
    • 双淬灭探针[HEX]ACCCAGCTC[BHQ2]TTTGAGGACAACTATGC[BHQ1]
  • 实验设置
    • ELISA 测定
    • Digital LightCycler^® DNA 预混液
    • 高分辨率板
    • HCT-116 gDNA 模板， ~1 cpp处
    • 900 nM / 250 nM & 450 nM / 125 nM 引物 / 探针浓度
    • 在每种条件下，设置一个阴性对照组，平行进行两次复制
    • 1D荧光散点分析
• 人类RNA靶标 (图 4)
  • HER2 (外显子 7)
    • 扩增子长度、引物和探针与上述HER2 DNA检测全部相同。
  • R4Q5 [DCK] (外显子 3)
    • 扩增子：122 bp
    • 正向引物CTCAGAAAAATGGTGGGAATGTT
    • 反向引物GCCATTCAGAGAGGCAAGCT
    • 标准探针[Cyanine5]CCTTCCAAACATATGCCTGTCTCAGTCGA[BHQ3]
    • 内淬灭探针[Cyanine5]CCTTCCAAA[BHQ2]CATATGCCTGTCTCAGTCGA
    • 双淬灭探针[Cyanine5]CCTTCCAAA[BHQ2]CATATGCCTGTCTCAGTCGA[BHQ3]
  • 实验设置
    • ELISA 测定
    • Digital LightCycler^® RNA 预混液
    • 高分辨率板
    • 50 ng Clontech qPCR Human Reference Total RNA
    • 450 nM / 125 nM 引物 / 探针浓度
    • 在每种条件下，设置一个阴性对照组，平行进行两次技术复制
    • 1D荧光散点分析

产品