蛋白研究的未来之星
Duolink™PLA®技术
科技发展的齿轮正在高速运转,每隔2-3年就会出现一个重大的技术变革引领生命科学走向更精细、更微观、更真实的水平,这其中也包括蛋白的研究。
说起蛋白互作的研究方法,你会想到什么?
酵母双杂交,免疫共沉淀和pull-down是最常用的蛋白互作实验方法。虽然有多种实验技术,但研究蛋白互作的科学家还是会被三个问题困扰:
1.实验结果是否能真实反映胜利水平的蛋白互作情况? 而不是体外条件下产生的假阳性结果
2.实验结果是否能检测微量的蛋白互作? 无论是微量蛋白样本还是转瞬即逝的短暂结合,都极富挑战
3.这几种手段的结果都是不可视的,我们不能看到细胞层面蛋白互作的分布和强度
是时候跟上蛋白研究技术变革的脚步,找到合适的新方法了!这些问题都随着Duolink™ PLA技术的出现迎刃而解!
Duolink™采用PLA专业技术,通过一抗、二抗、DNA滚环复制,可将蛋白信号放大1000倍,实现单分子级别的灵敏度。即便是微量样本、微弱互作、极罕见的低丰度表达,也能在内源水平可视化研究蛋白的互作、定位和定量。更关键的是该技术操作简单,仅需一天!
我们首先需要自己准备一对识别A和B的不同来源的一抗,例如鼠抗A,兔抗B;试剂盒里有一对二抗探针,这个探针就是在二抗上加了一段寡核苷酸链;还有成链寡核苷酸,用于滚环扩增的DNA酶,以及最后产生信号的荧光探针。
使用Duolink™试剂,无需改造细胞或蛋白,只要使用抗体即可开展实验,实验步骤迅速,当天即可完成,Duolink™应用非常广泛,堪称蛋白研究的多面手。至今已在肿瘤学、神经生物学、免疫学、病毒学、表观遗传学、生殖发育、组织病理学、心血管、代谢等研究领域进行了广泛报道。
总结来说,DuolinkTM技术主要有以下特点:
1.Duolink™可以让你对稳定、微弱及瞬时的内源性蛋白质相互作用进行可视化研究。
2.Duolink™技术使您能够在固定的细胞和组织中,对内源性修饰过程进行可视化的研究。
3.使用Duolink™可以让你对单个蛋白质或蛋白质-蛋白质间相互作用的内源表达水平进行检测。
此外,如需在同一个样品中分析多个蛋白质事件,可选用多色multicolor Duolink试剂盒, multicolor最多可在同一个样本中检测4个蛋白质事件。
单色或多色Duolink™结果可使用Imagetool软件进行信号统计,也可结合流式细胞术进行精确定量。结果真实可靠,检测灵敏方便,技术新颖又有说服力,简直是你发表文章的利器。
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