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默克火锅安全检测
非法添加物分析色谱法


罂粟壳又名“御米壳”,俗称“米壳”,为罂粟科植物罂粟的干燥成熟果壳,含有20多种生物碱,以吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁、蒂巴因5种异喹啉型生物碱为主。由于罂粟壳的易成瘾性,曾有报导一些不法商贩会将其加入火锅底料中,以达到吸引消费者的目的。消费者长期食用含有罂粟壳的食物,对人体肝脏、肾脏具有毒性损害作用,会使人成瘾、记忆性能衰退,严重可能对神经系统和消化系统造成损伤,甚至呼吸衰竭。 鉴于此,我国早在2000年已经将罂粟壳归类为“其他毒品”,2008年,中国卫生部发布《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单(第一批)》,罂粟壳就被列为非食用物质,严格监管,禁止在食品中添加。

目前,罂粟壳生物碱的定量测定方法主要有气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱联用法和液相色谱-质谱联用法。其中,气相和液相色谱法因复杂基质易产生假阳性,气相色谱法、气相色谱-质谱联用法样品需衍生化处理,超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)因选择性好、重复性好、灵敏度高应用愈来愈广泛。本应用采用QuEChERS方法进行预处理。并使用Ascentis® Express HILIC表面多孔色谱柱建立火锅底料中5种罂粟壳生物碱的UPLC-MS/MS分析色谱方法,该方法稳定、高效,可准确定量上述五种生物碱,为调味料中非法添加物的测定提供借鉴。

称取2g试样于50mL聚四氟乙烯具塞离心管中,加入60μL同位素内标(吗啡-D3、可待因-D3)工作溶液(5.0μg/mL),液体样品、半固体样品加入1-3mL水、固体样品加入5mL盐酸溶液。再分别涡旋振荡30s,准确加入15mL乙腈,密塞,涡旋振荡1min,超声处理30min,取出,加入Supel™ QuE乙酸提取管中的无机盐(55234-U),立即涡旋振荡2min,使吸附样品中的全部水分,以4000r/min离心5min,取上清液,以0.22μm滤膜过滤。取续滤液适量,进样,用于测定吗啡、可待因;准确量取续滤液1mL至20mL量瓶中,用乙腈稀释至刻度,摇匀,进样,用于测定罂粟碱、那可丁、蒂巴因。

吗啡、可待因、那可丁、罂粟碱和蒂巴因均为极性较强的化合物,在常规C18色谱柱中保留较差。因此,本实验选用HILIC亲水模式加强5种化合物在色谱柱中的保留。此外,吗啡和可待因的分子结构式非常相似, 二者的差异仅在与苯环相连的1个基团 (羟基, 甲氧基) ,使用全多孔HILIC色谱柱分离时,吗啡和可待因无法完全达到基线分离,而本实验中的Ascentis® Express HILIC表面多孔色谱柱,由于其异于全多孔硅胶颗粒的结构,在相同的柱压条件下,柱效比同粒径全多孔颗粒高40%,因此吗啡和可待因可以得到有效分离。

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