Merck
CN

CRISPR01

Sigma-Aldrich

CRISPR Human EMX1 Positive Control

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NACRES:
NA.51

形式

liquid

包装

pkg of 2 vials (50μL aliquot for each of the 2 kit components)

浓度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

application(s)

CRISPR

运输

dry ice

储存温度

−20°C

相关类别

一般描述

经验证的CRISPR位点,可作为Wt Cas9的实验对照。一个双组份阳性对照系统由一个CMV驱动型Cas9质粒和一个靶向人类EMX1基因的U6驱动型向导RNA质粒组成。

应用

功能性基因组学/靶点验证
  • 在细胞系中进行基因敲除
  • 建立基因敲入细胞系,将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中

特点和优势

使用WT Cas9,作为CRISPR编辑工作流程的实验对照。利用CRSIPR/Cas9系统对您的系统进行验证。错误匹配检测试验的阳性结果将表明您的系统是有效的。

组分

1管含1µg的U6-gRNA质粒,可表达一个靶向人类EMX1的向导序列。1管含1µg 的Cas9质粒。

原理

CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统,可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。

外形

Sigma U6-gRNA质粒可表达一个靶向人类EMX1的向导序列,以浓度为20ng/μl的50µl溶液形式提供。Sigma Cas9质粒的产品形式是浓度为20ng/μl的溶液50µl。

制备说明

Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装,
可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果,我们建议
在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。

其他说明

文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 μg/μl且≤5 μL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)

法律信息

CRISPR专利正在申请中

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

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After you have performed a CRISPR experiment it is important to determine which gRNAs performed successfully editing. There are many ways to validate CRISPR gene editing experiments. A quick and easy way to check for cutting is by using the Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit.

查看显示了使用FACS进行crispr/cas表达和富集的实验数据

实验方案

Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.

了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具,可让所有人掌握基因组编辑。

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Sigma-Aldrich® Advanced Genomics is the leading provider of gene editing and silencing technologies including CRISPR, Cas9, synthetic guide RNA (sgRNA), and Zinc Finger Nuclease (ZFN).

默克Sigma-Aldrich® Advanced Genomics提供了一整套用于基因敲减和过表达实验的优化CRISPRi和CRISPRa文库目前可提供CRISPRi和SAM CRISPRa混合的慢病毒文库,也可根据您的特定需求提供定制产品。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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