Merck
CN

CRISPR06

Sigma-Aldrich

CRISPR UNIVERSAL NEGATIVE CONTROL 1

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NACRES:
NA.51

形式

liquid

质量水平

包装

vial of 50 μL

浓度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

应用

CRISPR

运输

dry ice

储存温度

−20°C

相关类别

一般描述

通用CRISPRs阴性对照被设计为不能被人类,小鼠或大鼠基因组识别。单个载体形式包括Cas表达盒和gRNA序列。GFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对细胞群落进行富集。

应用

Functional Genomics/Target Validation
  • Creation of gene knockouts in cell lines
  • Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes

特点和优势

无需特定的靶向CRISPR/Cas9 系统,即可表达Cas9和GFP。

组分

1 管包含1μg 表达非靶向向导序列的U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒。

原理

CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统,可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。

外形

Sigma U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒表达非靶向的向导序列,以浓度 20ng/μl in 50μl的溶液形式提供。

制备说明

Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装,
可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果,我们建议
在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。

其他说明

文献中使用的标准转染浓度范围为2~8μg的单个的表达向导RNA和Cas9的载体。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)

法律信息

CRISPR专利正在申请中

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

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Mahsa Zarei et al.
Molecular cancer research : MCR, 17(2), 508-520 (2018-09-30)
Isocitrate dehydrogenase 1 (IDH1) is the most commonly mutated metabolic enzyme in human malignancy. A heterozygous genetic alteration, arginine 132, promotes the conversion of α-ketoglutarate to D-2-hydroxyglutarate (2-HG). Although pharmacologic inhibitors of mutant IDH1 are promising, resistance mechanisms to targeted
Takahiro Yamazaki et al.
Nature immunology, 21(10), 1160-1171 (2020-08-05)
Autophagy supports both cellular and organismal homeostasis. However, whether autophagy should be inhibited or activated for cancer therapy remains unclear. Deletion of essential autophagy genes increased the sensitivity of mouse mammary carcinoma cells to radiation therapy in vitro and in
Nathalie Falk et al.
Journal of cell science, 131(16) (2018-07-29)
Pericentrin (Pcnt) is a multifunctional scaffold protein and mutations in the human PCNT gene are associated with several diseases, including ciliopathies. Pcnt plays a crucial role in ciliary development in olfactory receptor neurons, but its function in the photoreceptor-connecting cilium
Aitziber Buqué et al.
Nature communications, 11(1), 3819-3819 (2020-08-01)
Hormone receptor (HR)+ breast cancer (BC) causes most BC-related deaths, calling for improved therapeutic approaches. Despite expectations, immune checkpoint blockers (ICBs) are poorly active in patients with HR+ BC, in part reflecting the lack of preclinical models that recapitulate disease

商品

After you have performed a CRISPR experiment it is important to determine which gRNAs performed successfully editing. There are many ways to validate CRISPR gene editing experiments. A quick and easy way to check for cutting is by using the Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit.

查看显示了使用FACS进行crispr/cas表达和富集的实验数据

实验方案

Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.

了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具,可让所有人掌握基因组编辑。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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