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蛋白质电泳凝胶染色剂

电泳分离后,通常使用凝胶染色剂来观察蛋白质条带。蛋白质凝胶染色剂利用染料结合或产生颜色的化学反应,选择性地与蛋白质发生反应,产生染色凝胶。蛋白质凝胶染色剂通常根据初始样品大小、所需检测方法以及下游分析的兼容性要求来选择。


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固定溶液

凝胶电泳后,通常要将蛋白质固定在凝胶中,以防止蛋白质在染色前分散。某些凝胶染色剂含有化学物质,染色前无需固定凝胶。

比色蛋白质凝胶染色剂

  • 库马西亮蓝用于通过与蛋白质氨基和羧基的静电作用对聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质进行染色。
  • ReadyBlue™蛋白质凝胶染色剂是一种用于聚丙烯酰胺凝胶的快速、灵敏的胶体库马西染色剂,以即用型溶液的形式提供,可加快和简化操作步骤。ReadyBlue™ 可通过比色法或红外荧光法进行成像。已证实 ReadyBlue™ 的灵敏度可低至每条带 2 毫微克。
  • EZBlue™ 凝胶染色试剂是一种方便、灵敏、安全的 Coomassie 亮蓝 G-250 胶体蛋白质染色剂,可改善蛋白质电泳结果,同时显著缩短染色时间。作为一种胶体染色剂,它只与蛋白质而非凝胶本身发生反应。由于减少了背景染色,因此几乎可以立即在聚丙烯酰胺凝胶和 PVDF 膜上观察到蛋白质条带。无需去染色步骤,但水洗可能会使条带增强并澄清背景。EZBlue™ 试剂灵敏度极高,最低可检测到 5 ng 蛋白质。
  • 可逆蛋白质检测试剂盒是一种独特的检测系统,设计用于对尼龙、硝酸纤维素和 PVDF 膜或 PAGE 凝胶上的蛋白质进行染色,检测灵敏度与 Coomassie 染色法相似。由于与尼龙膜之间存在强烈的电荷相互作用,大多数其他染色剂在尼龙膜上都会产生较高的背景。萘酚蓝黑染料可用于聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和硝酸纤维素膜上的蛋白质染色。电泳后,建议将蛋白质固定在凝胶中。然后用 0.1% Naphthol Blue Black(萘酚蓝黑)在 7% (v/v) 乙酸中染色至少 2 小时,再用 7% (v/v) 乙酸溶液去污。检测灵敏度约为 Coomassie Blue 的 20%
  • ProteoSilver™银染色试剂盒具有最高的灵敏度,每条带的灵敏度≥0.1 纳克蛋白质,孵育时间为 3-12 分钟。建议使用该染色剂处理丰度极低的蛋白质,并与 MALDI-TOF 应用兼容。

荧光蛋白凝胶染色剂

  • EZFluor™荧光染色剂1-step 荧光蛋白凝胶染色剂是一种即用型荧光蛋白凝胶染色剂,只需 5-30 分钟的染色步骤,无需固定,每个条带可检测到少至约 1-10 纳克的蛋白质。染色与质谱法和基于埃德曼的测序完全兼容。
  • EZFluor™紫外 1 步荧光蛋白凝胶染色剂是一种即用型蛋白凝胶染色剂,设计用于使用紫外透射照相机和与质谱法兼容的溴化乙锭滤光片成像。
  • SYPRO®Ruby蛋白质凝胶染色剂是一种即用型超灵敏荧光染色剂,用于检测聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离的蛋白质。这种染色剂专为二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-D PAGE)而设计,也被证明是一维聚丙烯酰胺凝胶电泳(1-D PAGE)和等电聚焦(IEF)凝胶的绝佳选择。SYPRO® Ruby 蛋白凝胶染色剂的灵敏度可与许多银染色技术相媲美。
  • SYPRO®橙色与 SYPRO® 红色相似,但它更亮一些,背景荧光略高。紫外线或宽带照明可有效激发该染料。它不适合染色印迹或 IEF 凝胶上的蛋白质,在染色二维凝胶上的蛋白质时灵敏度会降低。

去染色试剂

  • CoZap用于快速去除库马西蓝染色剂。独特的 CoZap 垫可直接放入去渍盘中,吸收溶液中的所有游离染料,无需更换去渍溶液。

相关资源

  • 蛋白电泳染色剂选择指南

    为满足蛋白分析的多样化需求,Sigma提供多种蛋白质可视化(染色)试剂。EZBlue™和ProteoSilver™专为蛋白质组学而设计,即使在传统的PAGE形式中依然表现出色。

  • Handbook: Protein Blotting Tips and Tricks

    This handbook represents the collective experience of our application scientists, who are actively engaged in advancing the science of protein blotting and detection.

  • Brochure: Rethink Western Blotting

    Explore our products designed to improve each step of the Western blotting workflow.



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