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主页DNA和RNA纯化RNAstable®实验方案

RNAstable®实验方案

产品描述

RNAstable®是一种独特的储存介质,可在室温下保存RNA样品数月。使用RNAstable®,您可以通过简单的重新水化,即只需加水便可完全恢复您的RNA样品。再水化的样品可立即使用,无需进一步纯化。

每个管或板所含有的RNAstable®是作为管或孔底部的涂层而提供的,可保护皮克至微克级的RNA。

注意事项和免责声明

本产品仅可用于研发用途,不可用于药物、家用或其他用途。请参阅产品化学品安全技术说明书,获取危害和安全操作方法相关信息。 

储存方法/稳定性

RNAstable®产品和试剂盒应在环境实验室温度下以原始未开封的包装干燥保存,并可随时开始使用。RNAstable®产品与防潮包一起装在防潮箔袋中。即使在不受控制的湿度环境中,样品袋也能保证干燥保存,成为保存在干燥储存柜中的替代方案。

操作流程

样本制备注意事项

RNA类型。适合保存在RNAstable®中的RNA类型包括从细胞、组织中纯化的总RNA以及poly(A) mRNA。

纯化技术。大多数标准分子生物学技术以及市售试剂盒都可与RNAstable® 保存相兼容。在应用于RNAstable®之前,应将不含RNase的纯化RNA重悬于DEPC处理过的水中。

得率测定。在样品应用到RNAstable®之前,应测定RNA样品的浓度。尽管不做强制要求,但将已知量RNA应用于RNAstable®保存可以促进样品回收以及随后的应用。为了获得RNAstable®的最佳保护效果,在每孔或每管中最大

100 uL体积的水中不要加入超过100 μg总量的RNA。

样品干燥及储存

  1. 测定样品中纯化RNA的量,并计算加入RNAstable®孔或管中的量。  在加入RNAstable®之前,应将RNA重悬于DEPC处理的水中。
  2. 向含有RNAstable®的孔或管的中央直接缓慢加入最多100 μL RNA样品
    为了实现最佳的样品保护和恢复效果,加入到每孔中用于空气干燥的最终样品体积应当小于20 μL;每孔或管中不要加入超过100 μL的水。
  3. 通过缓慢吹打将样品混匀(避免产生气泡)。
  4. 将未覆盖的样品进行干燥。对于体积小于20 μL的便捷式空气干燥,仅需将管或96孔板在超净台中开盖过夜。  对于体积20 μL或需要加速干燥,可使用不加热的真空浓缩器(干燥时间可参考下方的表1)。
表1采用真空浓缩器的干燥时间
  1. 将干燥剂包装 在原始袋中并加热密封。也可将干燥的样品在室温下储存在干燥的储存柜中。RNAstable®对温度和湿度敏感,因此在室温(15-25 °C)下将样品保存在防潮的环境中至关重要。建议的湿度水平小于30%相对湿度。

样本复苏

保存在RNAstable®中的RNA可通过加入水或水相缓冲液复苏。无需进一步纯化样品便可直接用于下游应用。

  1. 将10-100 μL DEPC处理过的水或水相缓冲液直接加入至RNAstable®中干燥的样品。
  2. 在室温孵育15分钟以实现充分的水化。  
  3. 通过缓慢吹打将样品进行混匀 。避免产生气泡。水化的样品可直接用于下游的应用。
  4. 未使用的水化样品在4 °C或室温最多储存3天。样品还可冷冻储存
    (-20 °C或-80 °C)更长时间。在含有RNAstable®的水中再水化的样品化可重新干燥而,并不会造成样品稳定效率降低。不推荐重复该过程超过三次。
材料
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