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主页新一代测序最大限度避免新一代测序接头形成二聚体

最大限度避免新一代测序接头形成二聚体

案例研究

项目情况

一家新一代测序(NGS)试剂盒厂商因使用其他寡核苷酸厂商的定制接头,正饱受接头二聚体之苦。由于这种材料要用于商业化试剂盒生产,故这种情况无法接受——制造商希望这种产品“即买即用”,无需在文库制备后去除二聚体。

我们的运营支持

制造商转用新一代测序寡核苷酸(NGSO)作为该问题的优化解决方案。在我们的合同制造环境中,我们与制造商的研发团队密切协作,针对目标NGS试剂盒提供接头。我们的目标是,引物二聚体相对于现有寡核苷酸厂商材料大幅减少。

定制解决方案

与我们的研发和生产团队协商后,制造商研发团队选择试用目前最高质量的选项NGSO-Gold。针对这一项目,双方团队持续沟通并开诚布公地对话是关键。这有助于双方共享数据并进行深入的NGS分析,最大限度避免二聚体形成。试用批次生产完成后,取少部分材料运送至制造商处针对各种功能性应用进行质检,包括文库制备、毛细管电泳分析和测序等应用。

结果

客户测试批次生成的数据表明,相对于现有寡核苷酸供应商提供的材料,使用NGSO-Gold生产的接头呈现明显更低的二聚体形成率——实际远低于所需的要求的接头二聚体形成比例(图1)。于是,这家制造商(现已成为我们的客户)选择继续与我们合作生产试剂盒所用的定制接头,甚至向我们分配了更多之前只在其内部执行的工作(如,专业的规格选择工作)。

NGSO相对于竞品大幅降低了二聚体形成率。

图 1.NGSO-Gold与现有寡核苷酸供应商竞品的接头二聚体形成情况对比(客户提供)。大规模生产时最容易形成接头二聚体,因此,测试时选用了这类规模的材料。从实际结果可以看出,竞品的引物二聚体形成率为26.23%。NGSO-Gold的接头二聚体形成率仅6.28%,远低于规定的上限15%。为保密起见,适当隐藏了确切的材料用量和实验详情。

材料
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