一般描述
GenElute™ Direct mRNA Miniprep试剂盒提供了一种方便的格式，可直接从哺乳动物细胞和组织中分离聚腺苷化mRNA。直接mRNA分离程序是基于Badley的方法。 多达107个哺乳动物细胞或40毫克组织经溶解和搅匀，借助过滤柱或
机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中，RNase被消除。 加入氯化钠，在10分钟的孵育期间，聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集，RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中，然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后，用100 μl of 10 mM Tris-HCl，pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中，RNase被消除。 加入氯化钠，在10分钟的孵育期间，聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集，RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中，然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后，用100 μl of 10 mM Tris-HCl，pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
cDNA合成、表达谱分析等程序需要从大量的rRNA和tRNA中分离mRNA。GenElute mRNA试剂盒提供了简便程序，用于从之前制备的总RNA或直接从哺乳动物细胞和组织中分离聚腺苷化mRNA。
直接制备mRNA是通过SDS/蛋白酶K消化破坏细胞或组织，释放RNA并消除rnase。该试剂盒使用寡聚物(dT)共价连接到1 μm聚苯乙烯珠，通过杂交捕获聚腺苷化mRNA。聚苯乙烯颗粒在杂交过程中保持悬浮状态，不需要像纤维素或磁性颗粒那样混合或摇摆。选择聚苯乙烯也是因为在更宽松的洗涤步骤下，低聚物(dT)聚苯乙烯珠比更常用的低聚物(dT)纤维素（2或3个洗涤步骤，而不是10个或更多）产生更清洁的mRNA。使用GenElute试剂盒，mRNA-珠复合物在微离心机旋转过滤器上洗涤，并洗脱到10 mM Tris-HCL中，pH 7.5。
多达107个哺乳动物细胞或40毫克组织经溶解和搅匀，借助过滤柱或机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中，RNase被消除。 加入氯化钠，在10分钟的孵育期间，聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集，RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中，然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后，用100 μL的10 mM Tris-HCl，pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
纯化后的mRNA可用于Northern分析、逆转录和PCR、阵列标记和其他常见应用。
直接制备mRNA是通过SDS/蛋白酶K消化破坏细胞或组织，释放RNA并消除rnase。该试剂盒使用寡聚物(dT)共价连接到1 μm聚苯乙烯珠，通过杂交捕获聚腺苷化mRNA。聚苯乙烯颗粒在杂交过程中保持悬浮状态，不需要像纤维素或磁性颗粒那样混合或摇摆。选择聚苯乙烯也是因为在更宽松的洗涤步骤下，低聚物(dT)聚苯乙烯珠比更常用的低聚物(dT)纤维素（2或3个洗涤步骤，而不是10个或更多）产生更清洁的mRNA。使用GenElute试剂盒，mRNA-珠复合物在微离心机旋转过滤器上洗涤，并洗脱到10 mM Tris-HCL中，pH 7.5。
多达107个哺乳动物细胞或40毫克组织经溶解和搅匀，借助过滤柱或机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中，RNase被消除。 加入氯化钠，在10分钟的孵育期间，聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集，RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中，然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后，用100 μL的10 mM Tris-HCl，pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
纯化后的mRNA可用于Northern分析、逆转录和PCR、阵列标记和其他常见应用。
应用
GenElute ™直接 mRNA 小量制备试剂盒已被用于从各种组织和细胞中分离 mRNA。
GenElute Direct Kit mRNA试剂盒提供了简便程序，用于从之前制备的总RNA或直接从哺乳动物细胞和组织中分离聚腺苷化mRNA。
特点和优势
- 40分钟内从总RNA中分离或60分钟内直接从细胞和组织中分离聚(A)+ mRNA
- 寡聚(dT)聚苯乙烯珠需要更少的清洗步骤
- 在10分钟内，在不混合或摇晃的情况下，在oligo(dT)聚苯乙烯珠上捕获mRNA
- 在10分钟内，在不混合或摇晃的情况下，在oligo(dT)聚苯乙烯珠上捕获mRNA（图1）
- 40分钟内从总RNA中分离（图2）或60分钟内直接从细胞和组织中分离（图3）聚(A)+ mRNA
- 寡聚(dT)聚苯乙烯珠需要更少的清洗步骤
法律信息
GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Collection tube 70 ea
- Elution solution 10 mL
- Filtration columns with tubes 70 ea
- Lysis solution 120 mL
- 5 M NaCl 8 mL
- Oligo(dT)-polystyrene beads 2 mL
- Proteinase K 25 mg
- Spin columns with tubes 70 ea
- 40% Glycerol solution 3 mL
- Wash Solution
- Low Salt Wash Solution
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警示用语：
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
储存分类代码
8A - Combustible corrosive hazardous materials
法规信息
新产品
此项目有
Human embryonic stem cell differentiation on tissue engineering scaffolds: effects of NGF and retinoic acid induction.
Inanc B
Tissue Engineering: Part A, 14(6), 955-964 (2008)
Identification and charactrization of glucoamylase from the fungus Thermomyces lanuginosus
Thor S Thorsen
Biochimica et Biophysica Acta (2006)
商品
Simple DNA/RNA purification methods aid genome analysis from various sources, enhancing research efficiency.
Understand how mRNA vaccines induce immunity. and read how synthetic mRNA is prepared for vaccine immunogens and other biopharmaceuticals. Find reagents for synthesis of mRNA.
简单的DNA和RNA纯法方法大幅推动了基因组和基因表达的分析和鉴定。人们需要快速、方便地从多种细胞来源分离DNA和RNA，包括哺乳动物、植物和细菌培养物来源的细胞和组织。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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