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Merck
CN

ORFPOOLWG

Sigma-Aldrich

MISSION® TRC3 人类全基因组慢病毒PRF库

别名:

ORF文库

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About This Item

UNSPSC代码:
41106609
NACRES:
NA.51

包装

pkg of 8x25 μL (vials)

质量水平

浓度

5x108  VP/ml (via p24 assay)

技术

capture ELISA: 5 × 108 TU/mL using p24

运输

dry ice

储存温度

−70°C

一般描述

我们可以提供迄今为止最大的全测序和预克隆的人类开放阅读框(ORF)集合,并以混合慢病毒全基因形式提供。MISSION® TRC3人全基因组混合ORF文库(由Broad研究所开发)包含17,000多个独特的ORF克隆,可编码超过12,000个用于过表达筛选的基因。该独家文库包含与每个ORF克隆相关的独特的24个核苷酸条形码序列,可轻松进行目标鉴定和深度测序/反卷积。


该现成的MISSION TRC3人慢病毒ORF混合库可帮助研究人员利用我们一流的慢病毒生产技术在难转染的细胞系中稳定整合、富集细胞并长期表达基因。 该系列为研究人员提供了独特的工具,通过调节基因和蛋白质表达来深入探索基因功能。

探索生物信号通路的经典遗传方法通常都从鉴定引起目标表型的突变开始。然而,野生型基因产物的过表达或错误表达也可能导致突变表型,从而为遗传学家提供了另一种强大的工具来鉴定可能无法使用传统的功能丧失分析法检测到的通路组分。整个基因组慢病毒ORF库填补了这一空白,为研究人员提供了进行重要生物学实验的强大研究工具。



无论是进行基因过表达研究还是验证RNAi或CRISPR实验的基因敲除/敲除结果,LentiORF都是蛋白质表达和基因分析工具的理想捷径。研究人员还需要从筛选中验证相关“hit”,以消除假阳性。这意味着研究人员需要确认所观察到的表型是否归因于目标基因。通过lentiORF重新表达目的基因是验证基因靶标的最广泛接受的方法。

MISSION TRC3人慢病毒ORF混合全基因组文库以8×25 μl等分试样的形式提供,最小滴度为5×108 TU/ml(通过p24测定法测定)。

应用

功能基因组学/过表达筛选/靶标验证

特点和优势

  • 无需机器人或专用设备,即可在实验室中高效筛选整个人类基因组(约12,000个基因)
  • 预克隆、序列确定、可随时表达的克隆
  • 蛋白表达的理想捷径:使用混合的慢病毒ORF对蛋白编码基因进行表达以评估其功能
  • 简单反卷积:嘌呤霉素文库带有条形码,由位于V5标签和翻译终止序列下游的24个核苷酸序列组成。每个克隆均包含一个易于识别的独特条形码序列,方便在混合筛选实验中进行简单的反卷积
  • EF1a启动子可驱动ORF构建体的表达,在某些细胞类型中CMV启动子不适用的情况下,可为其提供另一种选择
  • 嘌呤霉素抗性允许在含有新霉素或杀稻瘟菌素抗性的细胞中进行双重筛选实验
  • 细胞群富集:细胞转导后进行嘌呤霉素筛选,以创建长期稳定的细胞系
  • V5表位标签方便进行pull-down和免疫共沉淀实验,以确定蛋白间相互作用或通过免疫荧光对ORF进行标记和可视化
  • 提供阳性和阴性筛选对照(BFP和GFP),便于研究人员评估混合筛选实验是否成功
  • 慢病毒ORF可以通过转导感染多种哺乳动物细胞(包括难以转染的细胞或原代细胞系),以促进筛选目的的基因过表达
  • 通过Sigma-Aldrich′反卷积服务轻松、快速、经济地进行筛选
  • 节省时间:跳过PCR、克隆和DNA序列验证步骤

制备说明

Puro Kill曲线和每毫升CFU(菌落形成单位)的测定。在进行文库规模的筛选之前,必须进行两个预实验。访问Lentipools或参阅技术公告。

其他说明

该产品仅供研发使用,不可用作药物、家庭使用或其他用途。请查阅安全资料表,获取危险和安全操作规范信息。尽管生产的慢病毒转导颗粒是不可复制的,但仍然建议将其作为生物危害等级2级(RGL−2)生物体在实验室中进行处理。请遵循所有已发表的RGL-2指南,进行实验室废物处理和净化。

法律信息

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 3

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable


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