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安全信息

DUO92013

Sigma-Aldrich

Duolink®原位检测试剂FarRed

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别名:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
NACRES:
NA.32

产品线

Duolink®

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

荧光

λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50)

适用性

suitable for fluorescence

运输

dry ice

储存温度

−20°C

相关类别

一般描述

Duolink®原位远红色检测试剂包含所有必需的Duolink原位试剂，用于扩增和检测结合聚乳酸（PLA）®探针。检测探针包含荧光团（lex = 644nm，lem = 669nm），可以使用与Cy®5相同的滤光器进行可视化。使用Duolink原位试剂进行的实验可以检测和可视化固定细胞和组织样本中单分子水平的蛋白质相互作用、蛋白表达水平和翻译后修饰。

应用

Duolink®邻位连接技术（PLA®）允许在固定细胞和组织样本中内源检测单分子水平的蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白表达水平。

遵循Duolink®原位荧光协议使用本产品。还有一套短指令。

请访问我们的Duolink® PLA资源中心了解如何运行Duolink®实验、应用、故障排除等信息。

要完成完整的Duolink® PLA 原位实验，您需要两种识别两个靶表位的初级抗体（PLA、IHC、ICC或IF验证）。其他必要试剂包括一对不同物种的PLA探针（一个加号和一个减号）、检测试剂、清洗缓冲液和封固剂。请注意，初级抗体必须与Duolink® PLA探针来自同一物种。使用标准免疫荧光法检测设备进行分析。

特异性
远红荧光检测试剂通常与花青5过滤器一起使用。

应用注意点
需要在不同物种中产生两种初级抗体。在标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）分析中测试您的初级抗体（IgG类、单克隆或多克隆），以确定最佳固定、阻断和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片器细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定的、石蜡包埋（FFPE）或组织（新鲜或冷冻）。没有要求最小数量的细胞。

让我们替您做这些工作，了解更多关于我们的客户服务计划的信息，以加速您的Duolink®项目

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特异性
FarRed 荧光检测试剂通常是与花青素5滤光片一起使用。

应用说明
来自不同物种的两种一抗是必需的。在标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）检测中测试您的一抗（IgG类，单克隆或多克隆），以确定最佳的固定、封闭和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定的细胞、离心涂片细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定或石蜡包埋（FFPE）的组织（新鲜或冷冻）。无最小细胞数量要求。

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特点和优势

  • 不需要过度表达或基因操作
  • 高特异性（假阳性更少）
  • 滚环扩增导致的单分子灵敏度
  • 相对量化是可能的
  • 不需要特殊设备
  • 比FRET更快更简单
  • 与co-IP相比，准确性更高
  • 可发布的结果

组分

  • 5x连接 - 包含与PLA探针杂交的寡核苷酸和连接所需的除连接酶以外的所有组分
  • 1x连接酶（1个单位/μ；L）
  • 1x聚合酶（10个单位/μ；L）
  • 5x远红扩增 - 包含滚环扩增（RCA）所需的除聚合酶之外的所有成分。它还包含用荧光团标记的寡核苷酸探针，该探针与RCA产物杂交。
有关更多信息，请参见数据表。

检测试剂盒中不包括：

初级抗体、PLA探针、清洗缓冲液、封固剂

制备说明

储存和稳定性：在–20 °C条件下储存成分。酶应始终保持低温（–20 °C），从冷冻箱取出时需使用冷冻块。

法律信息

Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

储存分类代码

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 2

法规信息

常规特殊物品
含少量动物源组分生物产品

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How Proximity Ligation Assays (PLA) Work

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邻位连接技术（PLA）的工作原理

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Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

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