ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4) - ChIP免疫沉淀验证抗体和引物试剂套装

以前分配的蛋白质标识符Q66I33已合并至P84243。完整的详细资料见于UniProt数据库。

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4)套装包含抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体、阴性对照抗体（纯化小鼠IgG）、qPCR引物（用于扩增人GAPDH基因启动子的166bp区域）。三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例，可用于功能性验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关染色质的免疫沉淀。

约17 kDa的三甲基组蛋白H3

表位：a.a. 1-12

该三甲基组蛋白H3(Lys4)纯化抗体由对应组蛋白H3 1-12氨基酸的合成肽（Lys9三甲基化）免疫获得。

染色质免疫沉淀：
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒（货号17-611），对不处理或秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质（每次IP需1 X 10⁶细胞）进行染色质免疫沉淀。 采用扩增人B-珠蛋白启动子区的引物和GAPDH启动子区对照引物，经qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。 数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input)，ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna G ChIP（货号17-408）或EZ-ChIP（货号17-371）方案。

蛋白质印迹分析：
代表批次数据。
电泳分离HeLa细胞酸提取物，转印至PVDF膜，用1 μg/ml（泳道1）或0.5 μg/ml（泳道2）抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体（克隆号CMA304）检测。 通过HRP标记山羊抗小鼠二抗（货号AP124P）和化学发光检测系统对蛋白显色（如图）。

研究子类别
染色质生物学

研究类别
表观遗传学&核功能

该ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4)-ChIP验证抗体&引物套装方便提供了抗体&PCR特异性对照引物。

识别Lys4三甲基化的组蛋白H3，分子量(Mr)17 kDa。

该免疫原序列在广泛的动植物物种中是相同的。

25次测定/试剂盒，约2 μg/染色质免疫沉淀

抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体（小鼠单克隆IgG1，克隆号CMA304）。一个小瓶，包含50 μg蛋白G纯化抗体，溶于含有0.05%钠的50 μL PBS中。 储存于-20°C。

正常小鼠IgG。两个小瓶，包含25 μg纯化小鼠IgG，溶于25 μL储存缓冲液（含0.1%叠氮化钠）中。储存在-20 °C。

对照引物。一个小瓶，75 μL，人GAPDH启动子区特异性引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装，避免冻融循环。

对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。

染色质免疫沉淀：
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒（货号17-611），对秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质（每次IP需1 X 10⁶细胞）进行染色质免疫沉淀。使用对照引物通过qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna G ChIP（目录号17-409）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

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