一般描述
以前分配的蛋白质标识符Q66I33已合并至P84243。完整的详细资料见于UniProt数据库。
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4)套装包含抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体、阴性对照抗体(纯化小鼠IgG)、qPCR引物(用于扩增人GAPDH基因启动子的166bp区域)。三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例,可用于功能性验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关染色质的免疫沉淀。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4)套装包含抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体、阴性对照抗体(纯化小鼠IgG)、qPCR引物(用于扩增人GAPDH基因启动子的166bp区域)。三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例,可用于功能性验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关染色质的免疫沉淀。
特异性
识别Lys4三甲基化的组蛋白H3,分子量(Mr)17 kDa。
该免疫原序列在广泛的动植物物种中是相同的。
免疫原
表位:a.a. 1-12
该三甲基组蛋白H3(Lys4)纯化抗体由对应组蛋白H3 1-12氨基酸的合成肽(Lys9三甲基化)免疫获得。
应用
染色质免疫沉淀:
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒(货号17-611),对不处理或秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。 采用扩增人B-珠蛋白启动子区的引物和GAPDH启动子区对照引物,经qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。 数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input),ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna G ChIP(货号17-408)或EZ-ChIP(货号17-371)方案。
蛋白质印迹分析:
代表批次数据。
电泳分离HeLa细胞酸提取物,转印至PVDF膜,用1 μg/ml(泳道1)或0.5 μg/ml(泳道2)抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体(克隆号CMA304)检测。 通过HRP标记山羊抗小鼠二抗(货号AP124P)和化学发光检测系统对蛋白显色(如图)。
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒(货号17-611),对不处理或秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。 采用扩增人B-珠蛋白启动子区的引物和GAPDH启动子区对照引物,经qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。 数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input),ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna G ChIP(货号17-408)或EZ-ChIP(货号17-371)方案。
蛋白质印迹分析:
代表批次数据。
电泳分离HeLa细胞酸提取物,转印至PVDF膜,用1 μg/ml(泳道1)或0.5 μg/ml(泳道2)抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体(克隆号CMA304)检测。 通过HRP标记山羊抗小鼠二抗(货号AP124P)和化学发光检测系统对蛋白显色(如图)。
研究子类别
染色质生物学
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
该ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys4)-ChIP验证抗体&引物套装方便提供了抗体&PCR特异性对照引物。
包装
25次测定/试剂盒,约2 μg/染色质免疫沉淀
质量
染色质免疫沉淀:
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒(货号17-611),对秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。使用对照引物通过qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP G试剂盒(货号17-611),对秋水仙胺处理HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。使用对照引物通过qPCR验证三甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。
目标描述
约17 kDa的三甲基组蛋白H3
外形
抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体(小鼠单克隆IgG1,克隆号CMA304)。一个小瓶,包含50 μg蛋白G纯化抗体,溶于含有0.05%钠的50 μL PBS中。 储存于-20°C。
正常小鼠IgG。两个小瓶,包含25 μg纯化小鼠IgG,溶于25 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)中。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶,75 μL,人GAPDH启动子区特异性引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向:TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
正常小鼠IgG。两个小瓶,包含25 μg纯化小鼠IgG,溶于25 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)中。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶,75 μL,人GAPDH启动子区特异性引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向:TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
储存及稳定性
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装,避免冻融循环。
分析说明
对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
法律信息
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10 - Combustible liquids
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