ChIPAb+ 乙酰化组蛋白H3（Lys27）- ChIP验证的抗体和引物组

以前分配的蛋白质标识符Q66I33已合并至P84243。完整的详细资料见于UniProt数据库。

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H3（Lys27）组包括抗乙酰基组蛋白H3（Lys27）抗体，阴性对照抗体（纯化的小鼠IgG）和qPCR引物，可扩增人RPL10基因启动子内的178 bp区域。乙酰基组蛋白H3（Lys27）和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供，可用于功能上验证乙酰基组蛋白H3（Lys27）相关染色质的沉淀。

赖氨酸乙酰化是一种动态，可逆和严格调节的蛋白和组蛋白修饰，在染色质重塑和各种细胞功能中基因表达的调节中起主要作用。组蛋白乙酰化通常与转录激活有关，并且在活性增强子上发现H3K27的乙酰化。

识别Lys27乙酰化的组蛋白H3，Mr 17 kDa。

该肽序列在广泛的动植物物种中是相同的。

表位：氨基酸19-37

针对对应于组蛋白H3的氨基酸19-37的合成肽（Lys27乙酰化）制备乙酰基组蛋白H3（Lys27）纯化抗体。

乙酰基组蛋白H3（Lys27）ChIP验证的抗体&引物组，包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K27Ac染色质免疫沉淀。

染色质免疫沉淀：
使用2 µg正常小鼠IgG或抗乙酰基组蛋白H3（Lys27）抗体和Magna ChIP G（目录号17-611）试剂盒，对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 10⁶细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用β-珠蛋白启动子ChIP引物和RPL10启动子引物通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3（Lys27）相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna G ChIP（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）协议以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析：
未处理（泳道1）和丁酸钠处理（泳道2）HeLa细胞的酸提取物通过电泳分离，转移到PVDF膜上，并用抗乙酰基组蛋白H3（Lys27），克隆CMA309（0.1 μg/mL）探测。 使用与HRP偶联的山羊
抗小鼠二抗和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化（请参见图）。

研究子类别
染色质生物学

研究类别
表观遗传学&核功能

25次测定/试剂盒，约2 μg/染色质免疫沉淀

染色质免疫沉淀：
使用2 µg正常小鼠IgG或抗乙酰基组蛋白H3（Lys27）抗体和Magna ChIP G（目录号17-611）试剂盒，对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 10⁶细胞当量）进行染色质免疫沉淀。
使用ChIP引物RPL10启动子通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3（Lys27）相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna G ChIP（目录号17-409）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

~17 kDa

形式：纯化

抗乙酰基组蛋白H3（Lys27）（小鼠单克隆IgG1，克隆CMA309）。一个小瓶，包含50 μg蛋白G纯化抗体，溶于含有0.05%钠的50 μL PBS中。储存于-20°C。

正常小鼠IgG。两个小瓶，包含25 μg纯化小鼠IgG，溶于25 μL储存缓冲液（含0.1%叠氮化钠）中。储存于-20°C。

ChIP引物，RPL10启动子。一个小瓶含有75 μL的5 μM人RPL10启动子区域特异性引物。储存于-20°C。
对于：ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装，避免冻融循环。

对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人RPL10启动子特异性的对照引物。

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