从牛脑中纯化的天然G_βγ-亚基。为6条标准曲线提供足够的G-蛋白βγ-亚基。βγ-亚基具有生物活性，可用于复溶实验。可用于定量分析存在于任何特定细胞区室中的β-亚基。

神经递质和激素的许多膜受体通过异源三聚体G蛋白与细胞内效应子和离子通道偶联。配体对受体的激活导致GTP以催化方式交换异源三聚体G蛋白的β-亚基上的GDP，然后使β-亚基从βγ-亚基解离。后一种反应导致调节多种效应系统。最新证据表明，除了β-亚基之外，βγ-亚基也可能在效应系统调节中起作用。βγ-亚基与K⁺通道，磷脂酶C和A₂以及II型腺苷酸环化酶的调节有关。最新研究证明了βγ-亚基在β-肾上腺素能受体激酶靶向膜结合受体中的作用。该产品可用于定量存在于任何特定细胞区室中的β-亚基，并研究G蛋白在细胞内信号传导中的作用。纯化的标准品适用于阳性对照，或可用于使用抗G蛋白，β-亚基，内部（127-139）兔pAb（目录编号371738）构建标准曲线。

免疫印迹（见备注）

请参考特定浓度批号的标签。

在50 mM HEPES，1 mM DTT，1 mM EDTA，0.1% LUBROL 洗涤剂，pH 7.6中。

初次解冻后，分装冻存（-70°C）。

分析方法：



1.储备溶液在25 μL中含有1250 ng βγ。用该储备溶液制备工作标准品，如下所示：加入100 μl增溶缓冲液[20 mM Tris、1 mM EDTA、1 mM DTT、100 mM NaCl和0.9%胆酸钠（pH 8.0）]，并充分混合。这提供了10 ng/μL的浓度。用增溶缓冲液连续稀释，得到5 ng/μL、2.5 ng/μL、1.25 ng/μL和0.625 ng/μL。然后，除0.625 ng/μl（应为125 μl）外，每种标准品均应为62.5 μl。通过向每个标准品中加入93.75 μl含有甘油（25%w/v）、追踪染料（0.05%w/v）、SDS（5%w/v）、甘氨酸（3.6%w/v）和β-巯基乙醇（10%v/v）的样品缓冲液完成标准品的制备，0.625 ng/μl除外，此时应加入187.5 μl以达到所需浓度。

还应制备含有比例为1:1.5的增溶缓冲液和样品缓冲液（10 μl增溶缓冲液/15 μl样本缓冲液）的最终标准品，以得到零标准品。然后将全部标准品加热至80°C，保持4分钟。上述处方每25 μl体积提供100、50、25、12.5和6.25 ng的βγ-亚基。只要在制备标准曲线时存在这些量的βγ-亚基，则替代处方是可以接受的。

2.膜或细胞器制剂应在冰上溶解（使用先前描述的增溶缓冲液）1小时。此后，应将制剂离心以除去不溶物。应采用适当的方法测定上清液中蛋白的量。溶解的蛋白应使用增溶缓冲液稀释，以获得所需量的蛋白，以10 μL的体积加载。对于每10 μl溶解的蛋白，加入15 μl样品缓冲液。制剂应在80°C下加热4分钟。

3.通过标准方法，在用于电泳的SDS-PAGE凝胶的每个泳道中上样二十五（25）μl各标准品或样品。分离的蛋白质应通过标准方法利用电泳转移到硝酸纤维素膜或PVDF膜上。用标准阻断缓冲液[含有50 mM Tris，2 mM CaCl₂、80 mM NaCl、0.02%叠氮化钠和0.2% Nonidet P-40的缓冲液（pH 8.0）中的5%干脱脂牛奶]阻断1小时后，应使用提供的一抗在阻断缓冲液中以1:1000的因子稀释至少1.5 h探测印迹。洗涤后，可以通过您选择的方法将条带可视化。当您打算使用来自印迹的光密度读数构建标准曲线时，请使用碘化山羊抗兔IgG。

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毒性：标准处理（A）