TMB，可溶性

可溶性TMB底物，作为单组分系统提供。

过氧化物酶底物，产生可在370nm或650 nm处读取的蓝色可溶性终产物。使用停止溶液可将灵敏度提高两到四倍，并产生可在450 nm处读取的黄色溶液。

毒性：刺激性（B）

单组分系统，含有1.46 mM TMB、2.21 mM H₂O₂的专有溶剂，pH为3.1±0.5。

避免阳光直射。如果溶液变蓝或混浊，则丢弃。试剂在室温下是稳定的，但我们建议将其贮藏在冷冻机中以延长保质期。使用前加热至测定温度。

产品在4°C和18-26°C下进行稳定性测试。通过ELISA对最终产品进行产品性能测试。



在基于HRP的ELISA中使用TMB的建议程序：



1.用抗体和HRP标记的探针完成所有要求的培养。

2.用含有0.1%吐温^®-20洗涤剂的磷酸盐缓冲盐水（PBS）或Tris缓冲盐水（TBS）清洗板孔至少4次。

3.最后一次洗涤后，摇动并吸干孔中所有残留的缓冲液。

4．向每个孔中加入100 μl TMB溶液培养5-30 min。

5.测量选项：

a.对于动力学分析，可通过在中间间隔读取650 nm处的吸光度，将反应作为时间的函数进行监测。

b.对于保留蓝色色原的终点分析，应通过添加100µl 0.1%氟化钠（NaF）停止反应，并在650 nm处读取吸光度。

c.如果需要提高终点分析的灵敏度，应通过添加100 μl 500 mM H₂SO₄或250 mM HCl停止反应，并在5 MIN内在450 nm处读取吸光度。添加酸将蓝色自由基转化为黄色二亚胺，其在450 nm处吸收。



注：最佳培养时间可能因HRP的含量而异。如果颜色展开太快，零级动力学将不占上风。可能需要稀释探针、抗体或HRP标记试剂。时间、试剂体积和温度的变化也可能需要用户进一步标准化。

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