一般描述
蛋白酶K是从真菌林伯氏白色念球菌中分离出的高活性28,904-Da丝氨酸蛋白酶。该酶对天然和变性蛋白质具有广泛的切割特异性,广泛用于DNA和RNA的纯化。在变性剂如SDS(1%)和高温(50~60°C)存在下,其活性增加。对于蛋白质去除和酶灭活,推荐的工作浓度为50-100 µg/mL,对于组织处理,推荐的工作浓度为2 mg/mL。蛋白酶K冻干粉可制备成20 mg/ml的水溶液,并在-20°C下分装储存。该酶也可作为即用型浓缩储备液(600 mAU/ml),在大多数应用中可方便常规使用。1 mg蛋白酶K相当于30 mAU(AU=Anson单位)。Novagen蛋白酶K产品不含可检测的DNase和RNase
应用
在分离DNA和RNA的过程中,对核酸酶的蛋白水解失活起作用。
在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
生化/生理作用
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
警告
毒性:有害(C)
单位定义
1 AU(AU=Anson单位)定义为在37°C、pH 7.5下每分钟从酪蛋白中释放1.0 µmol(181 µg)酪氨酸的酶量。
法律信息
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
警示用语:
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
储存分类代码
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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