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文件

MAB369

Sigma-Aldrich

抗-多巴胺转运蛋白抗体,NT,克隆DAT-Nt

culture supernatant, clone DAT-Nt, Chemicon®

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别名:
DAT
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物来源

rat

质量水平

抗体形式

culture supernatant

抗体产品类型

primary antibodies

克隆

DAT-Nt, monoclonal

种属反应性

rat, human, mouse, monkey

制造商/商品名称

Chemicon®

技术

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable

同位素/亚型

IgG2aκ

NCBI登记号

UniProt登记号

运输

dry ice

靶向翻译后修饰

unmodified

基因信息

human ... SLC6A3(6531)

一般描述

跨膜多巴胺转运蛋白(DAT)位于突触前神经末梢,负责通过将多巴胺从突触间隙转运到多巴胺能神经元(再摄取)来终止多巴胺能传递。 多巴胺能途径与奖赏和成瘾、冲动、酒精中毒、多动症和退行性运动疾病(如帕金森′氏症、亨廷顿′氏症和舞蹈病)密切相关。

特异性

识别N末端多巴胺转运蛋白。 与密切相关的5-羟色胺和去甲肾上腺素转运蛋白无交叉反应性(Miller,1997)。使用MAB369在多聚甲醛固定的人脑冷冻切片上进行DAT的免疫定位显示,整个尾核、壳核和伏隔核都有密集的点状染色(Miller,1997)。

免疫原

与谷胱甘肽S-转移酶融合的人多巴胺转运蛋白的N末端。
表位:N末端

应用

研究子类别
离子通道&转运蛋白
研究类别
神经科学
蛋白质印迹: 在人尾核、壳核和伏隔核提取物(20μg总蛋白)的蛋白质印迹上识别约70-85 kDa的扩散带。

免疫组织化学:4%多聚甲醛固定组织(应注意不要过度固定组织);灌注,然后在固定后少于90分钟,然后冷冻保护。建议的工作稀释度为1:1,000-1:10,000。如果在大鼠组织上使用,建议使用吸收的抗大鼠二抗,并且使用大鼠PAP系统,或ABC检测会增强灵敏度。

免疫细胞化学:1:5,000至1:10,000。

免疫印迹(不建议用于大鼠)

最佳工作稀释度和方案必须由最终用户确定。



MAB369的免疫组织化学方案

该抗体已成功用于30 μm,自由浮动,4%多聚甲醛固定的小鼠脑组织。 所有步骤均在恒定搅拌下进行。 建议的方案如下。

1)在TBS(含或不含0.25% Triton)中清洗3 × 10分钟。

2)含3%血清的TBS中孵育30分钟(与来自二抗的宿主相同)。

3)将在TBS中适当稀释的一抗与1%血清(与来自二抗的宿主相同)(含或不含0.25% Triton)在室温下孵育2小时,然后在4°C下孵育16小时。

4)在TBS中清洗3 × 10分钟。

5)用含1%血清的TBS中适当稀释的二抗孵育(与来自二抗的宿主相同)。

6)在TBS中清洗3 × 10分钟。

7)TBS中的ABC Elite(1:200 Vector Labs)。

8)在TBS中清洗2 × 10分钟。

9)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。

10)加入0.06% NiCl的DAB反应进行强化。

11)在PBS中清洗2 × 10分钟。

12)在磷酸盐缓冲液(无盐水)中清洗1 × 10分钟。
该抗多巴胺转运蛋白抗体(N末端,克隆DAT-Nt)经验证可用于检测多巴胺转运蛋白的IC、IH、WB。

目标描述

约70-85 kDa

外形

未纯化
未纯化的组织培养物上清液,在装瓶前通过0.2 μm膜过滤。产品包含20%FBS和环丙沙星,终浓度为10μg/mL。

储存及稳定性

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。分装保存以避免反复冻融。为了最大程度地回收产品,需在融化后和取下盖子之前将原始样品管进行离心。

分析说明

对照
阳性对照:脑(尾核、壳核和伏隔核)组织

法律信息

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免责声明

除非我们的目录或产品随附的其他公司文件中另有说明,否则我们的产品预期仅用于研究用途,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或对人类或动物的任何类型的消费或应用。

储存分类代码

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

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Armando G Salinas et al.
Neuropharmacology, 108, 275-283 (2016-04-03)
The striatum is typically classified according to its major output pathways, which consist of dopamine D1 and D2 receptor-expressing neurons. The striatum is also divided into striosome and matrix compartments, based on the differential expression of a number of proteins
D Tomas et al.
PloS one, 11(4), e0153424-e0153424 (2016-04-15)
The dyskinesia of Parkinson's Disease is most likely due to excess levels of dopamine in the striatum. The mechanism may be due to aberrant synthesis but also, a deficiency or absence of the Dopamine Transporter. In this study we have
Methamphetamine increases locomotion and dopamine transporter activity in dopamine d5 receptor-deficient mice.
Hayashizaki, S; Hirai, S; Ito, Y; Honda, Y; Arime, Y; Sora, I; Okado, H; Kodama, T; Takada, M
Testing null
Weimin C Hong et al.
FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 27(8), 2995-3007 (2013-04-25)
The dopamine transporter (DAT) clears the extracellular dopamine released during neurotransmission and is a major target for both therapeutic and addictive psychostimulant amphetamines. Amphetamine exposure or activation of protein kinase C (PKC) by the phorbol ester PMA has been shown
Flotillins regulate membrane mobility of the dopamine transporter but are not required for its protein kinase C dependent endocytosis.
Sorkina, T; Caltagarone, J; Sorkin, A
Traffic null

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