抗-多巴胺D1A受体抗体，克隆SG2-D1a

重组大鼠D1a受体，羧基端。

抗多巴胺D1A受体抗体，克隆SG2-D1a可检测多巴胺D1A受体水平，&已发布&验证可用于IH & WB。

研究子类别
神经递质&受体

研究类别
神经科学

蛋白质印迹：针对来自大鼠尾状组织的未煮沸膜组分为1:250-1:500。 在额叶和颞叶皮层中也可以看到反应性。观察到45-66kDa之间的识别条带（Luedtke，1999）。

免疫组织化学：4% PFA固定，玻璃纤维切片，用3% NGS、1% BSA和0.2% triton X-100封闭。一抗仅在PBS中用过量的封闭剂稀释。

最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。

建议的蛋白质印迹方案

溶液

10X转移缓冲液 1L

Tris 115.3 gm

甘氨酸 24.2 gm

[SDS 4 gm（可省略）]

用于1X工作溶液： 1L

混合700 mL水

200 mL MeOH

100 mL 10X转移TBST

储备液 1 L

1M Tris pH 7.5 10 mL

5 M NaC 30 mL

10%吐温-20 5 mL

1.根据需要运行SDS-PAGE凝胶。

2.将PVDF膜（Millipore的ImmobilonP）浸泡在100%甲醇中1-2分钟，以润湿膜。

3.将膜浸泡在转移缓冲液中（见下文），直至准备进行印迹转移（>15分钟）。

4.组装凝胶转移夹层，使印迹朝向正极。

5.对于小分子量蛋白质，在100伏下将蛋白质从凝胶转移到膜上1-2小时，对于高分子量蛋白质的完全转移，在65 mA下将蛋白质从凝胶转移到膜上16小时（过夜）。

6.用Chemicon BLOT-FastStain（目录号2076）染色转移的条带。

7.用去离子水脱色。

8.用5%脱脂牛奶（Marvel或Carnation）的TBS或PBS封闭，4°C下过夜。脱脂牛奶应新鲜溶解，10000rpm离心10min，经玻璃滤器（Gelman Acrodisc）过滤。

9.与第一抗体在4°C轻轻搅拌下孵育过夜。

需要由最终用户确定最佳工作稀释度和孵育时间。

10.用TBST清洗至少3 × 5分钟。从该阶段开始，应省略叠氮化物。

11.在室温下与二抗（HRP偶联的山羊抗小鼠抗体，例如Chemicon目录号AP124P，适当稀释）一起孵育1小时。

12.用TBST清洗至少3 × 5分钟。

13.使用市售试剂盒（femtoLUCENT，Chemicon目录号2078）进行ECL。

多巴胺受体D1A，与D1B（D5）受体无交叉反应。发现免疫反应性对小鼠和大鼠D1A受体具有特异性。 通过蛋白质印迹分析，人、猪、狗、兔、绵羊和牛样品是非反应性的。

形式：纯化

纯化的免疫球蛋白。 液体形式，溶于0.02 M磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl（pH 7.6）和0.1%叠氮化钠中。

接收后，以未稀释的等分试样在2-8°C下保存长达6个月。

浓度：关于批次特定浓度请参见检验报告。

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