EmbryoMax^® 原代小鼠胚胎成纤维细胞

EmbryoMax系列PMEF细胞为研究人员提供了ES细胞培养的便捷解决方案，省去了耗时的饲养层细胞分离和制备过程。许多胚胎干细胞培养方案需要使用原代小鼠胚胎成纤维细胞（PMEF）细胞。在这些方案中，ES细胞通常在单层PMEF饲养层细胞上培养。 饲养层细胞在干细胞培养中发挥两个重要作用：它们会向培养基中分泌几种有助于维持其多能性的重要生长因子，并为ES细胞生长提供细胞基质。

原代小鼠胚胎成纤维细胞CF1株未经丝裂霉素C处理，可作为小鼠和人ES/iPS细胞的饲养层。 细胞在第3代提供，可进一步扩增约5-6代，冷冻备用。

铺板MEF饲养层细胞

程序：

1.在解冻PMEF饲养层细胞之前，用明胶溶液包被平板/烧瓶
2.在37°C水浴中快速解冻PMEF小瓶，并转移至15 mL试管中（已含有10 mL温PMEF饲养层细胞培养基）。轻轻倒置试管以进行分散，并以300 xg离心4–5分钟。
3.去除上清液，将细胞团块重悬于温热的PMEF饲养层细胞培养基中。
4.从平板/烧瓶中取出明胶溶液，并按照小鼠ES方案指南表4.1中推荐的密度等分PMEF饲养层细胞悬液。
5.在37°C和5%CO2下孵育PMEF饲养层细胞。使用鼠标ES方案指南中的图4A、B和C作为正确PMEF密度和
外观估计的指南。糊化平板可使用12–14天。

原代小鼠胚胎成纤维细胞

5-6x10⁶ ea

将细胞冷冻保存在单个小瓶中，每小瓶约含5-6 x 10⁶个成纤维细胞，并以每包5小瓶的形式出售，并在第3代时提供。有关PMEF细胞的完整培养和培养基，请参见ES干细胞手册。

接收后，小瓶应在-80°C下储存。如果储存时间超过6个月，则在液氮的气相中储存2年（确保盖紧）。

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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