用途
sufficient for 25 reactions (100 pmol oligonucleotide per assay; 1 ug of a 30-mer oligonucleotide)
质量水平
制造商/商品名称
Roche
储存条件
avoid repeated freeze/thaw cycles
环保替代产品特性
Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.
sustainability
Greener Alternative Product
环保替代产品分类
一般描述
我们致力于为您带来更加绿色的替代产品，这些产品遵守一项或多项绿色化学12项原则。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案，可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性，因此使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
第二代DIG寡核苷酸加尾试剂盒可利用末端转移酶。在它的催化下地高辛（DIG）-11-脱氧尿苷三磷酸（dUTP）和脱氧腺苷三磷酸（dATP）被添加到寡核苷酸的3′-OH末端上。
应用
第二代DIG寡核苷酸加尾试剂盒已被用于标记以下应用中的寡核苷酸探针：
- Northern印迹杂交检测
- 原位杂交 (ISH)。
- 荧光原位杂交 (FISH)。
特点和优势
使用DIG-11-dUTP 和重组末端转移酶拖尾3'处的寡核苷酸。寡核苷酸用 DIG-dUTP 和 dATP 加尾，平均尾长 为50 个核苷酸（尾长范围：10-100）。
- 由于掺入了几种DIG核苷酸，因此杂交探针非常敏感
- 由于寡核苷酸具有小分子量，可用于快速杂交动力学
- 单链探针，在杂交过程中不会复性
- 可以根据实验设计序列
- 特别适用于原位杂交；由于寡核苷酸具有小分子量，因此易于扩散到固定的组织和细胞中。
包装
包含11种组分的1个试剂盒
原理
DIG-dUTP和dATP的浓度应使DIG掺入尾部的浓度最高，并具有最佳的DIG和dATP间距，从而在杂交实验中获得最高的灵敏度。DIG-dUTP和dATP作为单独的溶液提供，可以在尾长度、半抗原间隔和未标记核苷酸的使用方面提供更大的灵活性。
制备说明
工作浓度：寡核苷酸
在一种标准的标记反应中，最多可应用100 pmol寡核苷酸（1μg 30聚体寡核苷酸）。
在一种标准的标记反应中，最多可应用100 pmol寡核苷酸（1μg 30聚体寡核苷酸）。
储存及稳定性
-15至-25 °C储存。（试剂盒不打开）
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Reaction Buffer 5x concentrated
- CoCl<SUB>2</SUB> Solution 25 mM
- DIG-dUTP Solution 1 mM
- dATP Solution 10 mM
- Recombinant Terminal Transferase 400 U/μl
- Control Oligonucleotide, unlabeled 20 pmol/μl
- Oligonucleotide, DIG-dUTP/dATP tailed 2.5 pmol/μl
- Control DNA 0.25 mg/ml
- Glycogen Solution 20 mg/ml
- DNA Dilution Buffer, 50 μg/ml fish sperm DNA
- Poly(A) Solution 10 mg/ml
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警示用语：
Danger
危险分类
Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Repr. 1B
储存分类代码
6.1D - Non-combustible, acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
WGK
WGK 3
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