一般描述
随机引物 DNA 标记试剂盒是以随机寡核苷酸为引物，用修饰的脱氧核苷三磷酸对 DNA 进行放射性和非放射性标记。该方法通过 Klenow 聚合酶用 3′-作为引物的随机寡核苷酸的 OH 末端。
特异性
热灭活：通过加入2μl 0.2MEDTA (pH 8.0) 和/或加热至 65°C 10 分钟来停止反应。
应用
随机引物 DNA 标记试剂盒用于标记短于1 kb 的探针或片段。
随机引物 DNA 标记试剂盒用于用任何 [α-32P] -dNTP 或修饰的 dNTP 均匀标记质粒或噬菌体 DNA。具有高比活性的标记 DNA 探针用于多种杂交技术，包括：
- 基因文库的筛选
- Southern、斑点 和 northern 印迹
- 原位 杂交
包装
1 个试剂盒包含 7 种组分。
制备说明
工作溶液： 制备 dNTP 储备混合物
为避免移液不准确，由于体积较小，制备未标记 dNTP 储备混合物。等分试样应保存在-15~-25°C，避免反复冻融
制备 DIG 贮备液混合物
为避免因体积较小导致移液不准确，制备 DIG 储备混合液。为此，将地高辛-11-dUTP [3 mM] 和 dTTP（小瓶 5）按 1:1 混合。对于每个标记反应，使用 1.6μl。
为避免移液不准确，由于体积较小，制备未标记 dNTP 储备混合物。等分试样应保存在-15~-25°C，避免反复冻融
- dATP、dGTP、dTTP 混合物：
一个标记反应移液器：
1μl dATP
1μl dGTP
1μl dTTP 至反应瓶
制备 DIG 贮备液混合物
为避免因体积较小导致移液不准确，制备 DIG 储备混合液。为此，将地高辛-11-dUTP [3 mM] 和 dTTP（小瓶 5）按 1:1 混合。对于每个标记反应，使用 1.6μl。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Control DNA lambda, 20 μl 12.5 µg/ml
- dATP, 50 μl 0.5 mM
- dCTP, 50 μl 0.5 mM
- dGTP, 50 μl 0.5 mM
- dTTP, 50 μl 0.5 mM
- Hexanucleotide mixture in 10x reaction buffer (100 μl)
- Klenow enzyme, labeling grade (100 U)
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
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