Merck
CN

11175025910

Roche

DIG RNA标记试剂盒(SP6/T7)

greener alternative

sufficient for 2 x 10 labeling reactions, kit of 1 (12 components), suitable for hybridization, suitable for Southern blotting

登录查看公司和协议定价

别名:
DIG系统, RNA标记

用途

sufficient for 2 x 10 labeling reactions

质量水平

包装

kit of 1 (12 components)

manufacturer/tradename

Roche

环保替代产品特性

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

technique(s)

Northern blotting: suitable
Southern blotting: suitable
hybridization: suitable

环保替代产品分类

储存温度

−20°C

一般描述

检测时间:145分钟
样品材料
  • 线性化质粒DNA
  • PCR产物
原理
DIG RNA标记试剂盒可产生已知长度的DIG标记单链RNA 探针。SP6或T7 RNA聚合酶都可在体外对来自模板DNA(在地高辛-UTP存在情况下)对这些探针进行转录。
RNA标记通过体外转录完成
待转录的DNA被克隆至含有SP6及T7 RNA聚合酶的合适转录载体的多接头位点(pSPT 18或19)。相邻的模板DNA在合适的位点进行线性化而RNA聚合酶用于生成“流失的”转录本。DIG-UTP被插入至转录本中。新合成RNA的每个第20至25个核苷酸都是DIG-UTP。由于核苷酸的浓度在标准转录反应中并不会成为限制,该反应可生成大量的标记RNA。
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。  DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
试剂盒用于通过SP6和T7聚合酶进行的体外转录而实现基于地高辛-UTP的RNA标记。通过这种方法,已知长度的单链RNA探针被生成,而这可用于多种杂交技术中。

特异性

灵敏度及特异性
DIG标记的RNA探针可在最低至1 μg的哺乳动物DNA中按照以下的检测条件进行单拷贝基因的检测:该杂交混合液包含20至100 ng标记探针/ml,而结合的探针可通过抗DIG-AP进行检测并通过化学发光底物CDP-Star进行可视化。
热灭活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。

应用

用于利用SP6及T7 DNA聚合酶通过体外转录而使用DIG-11-UTP进行RNA标记。DIG标记的“流失”转录本是以高效率进行合成的,并用于多种杂交技术:
  • Northern blots
  • Southern blots
  • 原位杂交
  • 菌斑或克隆提升
  • RNase保护试验
由于高度特异性和敏感的检测系统,DIG标记的探针可用于1μg 总人类DNA中单拷贝基因的检测。
注意:由于DIG和UTP之间的连接对于碱具有抗性,DIG标记的RNA可通过碱处理进行片段化。略微降低DIG标记的RNA探针的大小可能会使其更为适合于原位杂交中的特定应用。

包装

1个试剂盒包含12种组分。

质量

检测原理:待转录的DNA模板将会被克隆至含有SP6及(或)T7 RNA聚合酶启动子的合适转录载体的多接头位点。当在合适位点进行线性化后,RNA在DIG-UTP的存在下进行了转录。在标准条件下,来自1μg 模板的约10μg的全长DIG标记RNA被转录。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • pSPT18 DNA 0.25 mg/ml

  • pSPT19 DNA 0.25 mg/ml

  • Control DNA 1, pSPT18-Neo, cleaved with Pvu II 0.25 mg/ml

  • Control DNA 2, pSPT19-Neo, cleaved with Pvu II 0.25 mg/ml

  • DIG-labeled Control RNA, DIG-labeled "antisense" neo RNA 100 ng/µl

  • Unlabeled Control RNA, neo poly (A) "sense" RNA 200 µg/ml

  • NTP Labeling Mixture 10x concentrated

  • Transcription Buffer 10x concentrated

  • DNase I, RNase-free 10 U/µl

  • Protector RNase Inhibitor 20 U/µl

  • SP6 RNA Polymerase 20 U/µl

  • T7 RNA Polymerase 20 U/µl

查看所有结果 (12)

象形图

Exclamation mark

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 2

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

常规特殊物品

分析证书(COA)

输入产品批号来搜索 分析证书(COA) 。批号可以在产品标签上"批“ (Lot或Batch)字后找到。

已有该产品?

为方便起见,与您过往购买产品相关的文件已保存在文档库中。

访问文档库

难以找到您所需的产品或批次号码?

在网站页面上,产品编号会附带包装尺寸/数量一起显示(例如:T1503-25G)。请确保 在“产品编号”字段中仅输入产品编号 (示例: T1503).

示例

T1503
货号
-
25G
包装规格/数量

其它示例:

705578-5MG-PW

PL860-CGA/SHF-1EA

MMYOMAG-74K-13

1000309185

输入内容 1.000309185)

遇到问题?欢迎随时联系我们技术服务 寻求帮助

批号可以在产品标签上"批“ (Lot或Batch)字后面找到。

Aldrich 产品

  • 如果您查询到的批号为 TO09019TO 等,请输入去除前两位字母的批号:09019TO。

  • 如果您查询到的批号含有填充代码(例如05427ES-021),请输入去除填充代码-021的批号:05427ES。

  • 如果您查询到的批号含有填充代码(例如 STBB0728K9),请输入去除填充代码K9的批号:STBB0728。

未找到您寻找的产品?

部分情况下,可能未在线提供COA。如果搜索不到COA,可在线索取。

索取COA

Maria Lynn Spletter et al.
Neural development, 2, 14-14 (2007-07-20)
Precise connections of neural circuits can be specified by genetic programming. In the Drosophila olfactory system, projection neurons (PNs) send dendrites to single glomeruli in the antenna lobe (AL) based upon lineage and birth order and send axons with stereotyped
Parvaneh Alizadeh et al.
Experimental eye research, 83(3), 679-687 (2006-05-11)
Cystatin C is the major inhibitor of the cysteine cathepsins. Polymorphisms in the cystatin C gene have recently been associated with the risk of developing Age-related Macular Degeneration (AMD). Oxidative stress is also thought to play a key role in
Nathan Luebbering et al.
PloS one, 8(10), e76775-e76775 (2013-10-23)
The DYRKs (dual-specificity tyrosine phosphorylation-regulated kinases) are a conserved family of protein kinases that are associated with a number of neurological disorders, but whose biological targets are poorly understood. Drosophila encodes three Dyrks: minibrain/Dyrk1A, DmDyrk2, and DmDyrk3. Here we describe
Yu Liang et al.
Molecular medicine reports, 5(4), 1087-1091 (2012-01-17)
Schistosoma japonicum (S. japonicum) is an extremely harmful pathogen, which infects humans and causes severe public health problems. To date, no effective therapeutic drugs for this pathogen are available. In this study, we designed and constructed three hammerhead ribozymes targeting
Anna Karlgren et al.
Journal of visualized experiments : JoVE, (26)(26), doi:10-doi:10 (2009-04-21)
The high-throughput expression analysis technologies available today give scientists an overflow of expression profiles but their resolution in terms of tissue specific expression is limited because of problems in dissecting individual tissues. Expression data needs to be confirmed and complemented

商品

地高辛(DIG)标记方法和试剂盒适用于DNA和RNA DIG探针、随机引物DNA标记、切口平移标记、5'和3'寡核苷酸末端标记。

Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.

实验方案

在μg级测定标记效率(标准标记反应的预计产量为每μg 线性模板DNA经过DIG RNA标记反应后可得到20 μg的DIG标记RNA)

Determine the labeling efficiency in terms of μg (expected yield of a standard labeling reaction is 20 μg of DIG labeled RNA per μg linearized template DNA after the DIG RNA labeling reaction).

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

联系技术服务部门