Merck
CN

11444646001

Roche

尿嘧啶-DNA 糖基化酶

recombinant from E. coli K 12

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别名:
PCR, UDG

重组

expressed in E. coli

质量水平

形式

solution

包装

pkg of 100 U

制造商/商品名称

Roche

浓度

1000 U/mL

技术

PCR: suitable
mutagenesis: suitable

颜色

colorless

pH值(酸碱度)

7.9-8.1 (68 °F)

溶解性

water: miscible

适用性

suitable for molecular biology

应用

life science and biopharma

异质活性

RNases 10 units, none detected
endonuclease 20 units, none detected

储存温度

−20°C

一般描述

尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UNG)含有在原核生物和真核生物中发现的同名酶的高活性重组形式。它水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键,切除尿嘧啶,并在 DNA 中产生碱敏感的脱碱基位点。核酸内切酶、加热或碱处理可水解这些脱碱基位点。根据 DNA 的制备方式,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于实现一般的、位点特异性的或链特异性的 U-DNA 切割。

特异性

  • 尿嘧啶-DNA 糖基化酶水解单链和双链 DNA 中 U-DNA 位点的尿嘧啶糖苷键,切除尿嘧啶,并在 DNA 中形成碱敏感的脱碱基位点。
  • 该酶对单链 DNA 的活性高于双链 DNA。
  • 对小 U-DNA 寡核苷酸和 dUMP 也具有活性(Duncan,未发表的研究结果)。
  • 尿嘧啶-DNA 糖基化酶对 RNA 和天然的无尿嘧啶 DNA 无活性。

热灭活:95℃,10 分钟
尿嘧啶-DNA 糖基化酶在 95℃ 温育 30 分钟后保持部分活性(<10%)。

应用

尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于在已掺入脱氧尿苷酸残基的任何位点切割 DNA。U-DNA 可以通过体外方法(如 PCR)制备。根据 DNA 的制备方式,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以实现一般的、位点特异性的或链特异性切割。因此,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以帮助您:
  • 预防 PCR 中的携带污染
  • 提高定点突变实验的效率
  • 标记寡核苷酸探针

质量

通过在扩增反应之前,添加约 105dU(含有模板) 来检测携带预防活性。UNG 处理后,检测不到扩增产物。该酶不含任何污染的外切或内切核酸酶,并且经检测不含 RNA 酶。

单位定义

一个单位的尿嘧啶-DNA 糖基化酶是在 +37℃ 下,在 60 分钟内能够完全降解 1 μg 纯化的含有尿嘧啶的单链 DNA(噬菌体 M13,生长在 大肠杆菌 CJ 236 dut-ung- 中)所需的酶量。
一个 Lindahl 单位的酶是指在 +37°C 下,在 1 分钟内能释放 1 μmol 尿嘧啶所需的酶量。根据我们的单位定义,一个 Lindahl 单位对应于 520,000 U。

体积活动:1 U/μl

外形

提供 1U/μl 的该酶,溶于储存缓冲液。

储存及稳定性

可冷冻(DNA合成后)

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

No data available

闪点(°C)

No data available

法规信息

含少量动物源组分生物产品
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