Merck
CN

11585606910

Roche

DIG-High Prime

greener alternative

sufficient for 40 labeling reactions, pkg of 160 μL, solution

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别名:
DIG系统

形式

solution

质量水平

用途

sufficient for 40 labeling reactions

包装

pkg of 160 μL

制造商/商品名称

Roche

环保替代产品特性

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

环保替代产品分类

储存温度

−20°C

一般描述

DIG-High Prime是酶和核苷酸的混合物,用于用地高辛-11-dUTP 快速标记随机引物DNA。在此方法中,将随机寡核苷酸的3′-OH末端作为引物,由Klenow聚合酶合成变性DNA的互补DNA链。经一小时孵育或过夜孵育后,得到高产量的DIG 标记探针。
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品设计为更安全的化学品。  DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交DNA的唯一选择。

特异性

热灭活:通过加入 2 μl 0.2 M EDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 10 分钟来终止反应。

应用

DIG-High Primer标记DNA探针用于多种杂交技术:
  • Southern 印迹
  • Northern 印迹
  • 斑点/狭缝印迹
  • 筛选基因文库
  • 原位杂交
由于高度特异性和灵敏的检测系统,DIG 标记 DNA 探针可用于 1μg 总人类 DNA中的单拷贝基因检测。对碱不稳定的 DIG-dUTP 中,地高辛部分由碱不稳定酯键与间隔臂连接,这样能够更轻松有效地剥离印迹和重新标记印迹。

特点和优势

DIG-High Prime 保证有效标记:
  • 标准反应中 DNA 含量范围为 10ng 至 3μg。
  • 不同长度的 DNA,从小的限制性片段到 λ 或粘粒 DNA。
  • DNA,超螺旋或线性化。
  • 低熔点琼脂糖中的 DNA。

标记效率:
用 1μg 模板进行的标准标记反应在 1 小时后产生 0.8μg 新合成的洋地黄毒苷标记的 DNA,在 + 37℃ 温育 20 小时后产生 2μg。

内容
5x 浓缩的随机引物混合物:1U/ μl Klenow 聚合酶,标记级,1mM dATP,1mM dCTP,1mM dGTP,0.65mM dTTP,0.35mM DIG-11-dUTP,在 50%(v/v)甘油中碱不稳定。

质量

功能测试:
在 1μg 线性化 pBR 328 的标准测定中,1 小时后合成 0.8μg DIG 标记的 DNA,20 小时后合成 2.3μg。当该标记的 DNA 用于以 20ng/ml 的浓度杂交时,通过化学发光,用抗 DIG-碱性磷酸酶缀合物和 CSPD 在斑点印迹或 Southern 印迹上检测 0.03pg 同源 DNA。

原理

根据随机引物标记技术,用 DIG-High Prime 产生 DIG 标记的 DNA 探针。DIG-High Prime 是一种专门开发的反应混合物,含有地高辛-11-dUTP 和随机引物标记所需的所有试剂,包括 Klenow 酶,在优化的 5x 浓缩反应缓冲液(在 50% 甘油中)中预混合。

制备说明

反应混合物或杂交缓冲液中的 DIG 标记的探针在 -15 至 -25℃ 下可稳定储存超过 12 个月。如果在使用前新鲜变性,它们可以重复使用几次。

检测时间:80 分钟

样品材料
  • 至少 100bp 的 DNA 片段
  • 线性化质粒,粘粒或 λDNA
  • 超螺旋 DNA
  • 或最小量的 DNA(10ng),例如从凝胶或熔融琼脂糖中分离的 DNA 限制片段

注意:为了获得最佳结果,模板 DNA 应该线性化,并且片段长度为 100bp,或更长。如果 DNA 模板 >5kb,在标记前使用 4bp 切口的限制性内切酶进行限制性消化。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

No data available

闪点(°C)

No data available

法规信息

常规特殊物品
含少量动物源组分生物产品

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Characterization of the Chromosomal Transmission of Intergeneric Hybrids of spp. and by Genomic in situ Hybridization.
Wang X
Crop Science, 50, 1642-1648 (2010)
Light regulation of asexual development in the rice blast fungus, Magnaporthe oryzae
<BIG>Lee K, et al.</BIG>
Fungal genetics and biology : FG & B, 43 (2006)

商品

Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.

地高辛(DIG)标记方法和试剂盒适用于DNA和RNA DIG探针、随机引物DNA标记、切口平移标记、5'和3'寡核苷酸末端标记。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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