一般描述
细胞和组织的 DNA 分离试剂盒提供中等和大规模的纯化基因组 DNA 制备,大小从 50到150kb不等。去除各种生物标本(哺乳动物组织、培养细胞、酵母、革兰氏阴性菌或小鼠尾巴)中的污染 RNA 和蛋白质。
应用
用于细胞和组织的 DNA 分离试剂盒已用于从各种各样的起始物料中分离 DNA。分离的 DNA 适用于许多分子生物学应用:
- 基因组 Southern 印迹法
- 测序
- 限制性酶切
- PCR/长 PCR
- 克隆
特点和优势
在 2.5 小时内获得 DNA 产量的增加。
只需要一个简单、直接的过程(与基于列的方法相比)。
增加安全性和便捷性 。
避免使用离液盐、阴离子交换柱和有害有机溶剂。
减少纯化时间。
试剂盒中包含所有所需试剂。
只需要一个简单、直接的过程(与基于列的方法相比)。
增加安全性和便捷性 。
避免使用离液盐、阴离子交换柱和有害有机溶剂。
减少纯化时间。
试剂盒中包含所有所需试剂。
组分
- 细胞裂解缓冲液
- 蛋白酶 K 溶液
- 核糖核酸酶溶液
- 蛋白沉淀液
质量
每批用于细胞和组织的 DNA 分离试剂盒均检测是否存在 DNA 酶污染。进行纯化牛肝脏 DNA 的功能试验,随后用扩增高保真 PCR 系统进行特异性扩增。
制备说明
在存在强阴离子洗涤剂和蛋白酶 K 的情况下,在细胞裂解缓冲液中匀浆化样品材料。通过 RNA 酶处理除去 RNA,并通过选择性沉淀和离心除去蛋白质。最后通过异丙醇沉淀法从溶液中回收纯化的 DNA。
其他说明
分离 DNA 的纯度: 平均 A 260 /A 280 比例:1.7-1.9
分离高分子量 DNA
试剂盒简化了 50~150 kb 基因组 DNA 的分离。
分离高分子量 DNA
试剂盒简化了 50~150 kb 基因组 DNA 的分离。
图 1:用细胞和组织的 DNA 分离试剂盒制备的基因组 DNA 的短和长 DNA 片段的扩增。 从多种来源分离基因组 DNA,然后用 Taq DNA 聚合酶、扩增高保真 PCR 系统或扩增长模板 PCR 系统进行扩增。
泳道 2、3: 人 DMD 片段 (268 bp) 和小鼠 c-myc 片段 (580 bp),用 Taq DNA 聚合酶扩增
泳道 4、5、7、8: 人 c-myc 片段 (1.2kb),小鼠 β2-微球蛋白片段 (3.6kb)、牛溶菌酶基因片段 (6.9kb) 和人 tPA 基因片段 (9.3kb),均用扩增的高保真 PCR 系统扩增
泳道 6、9、10: 小鼠 α-② 胶原基因片段(5.6kb 和 10.4kb)与人 β-珠蛋白片段 (23kb),用扩增长模板 PCR 系统扩增
泳道 1,11: DNA 分子量标记物 VI 和 II
泳道 2、3: 人 DMD 片段 (268 bp) 和小鼠 c-myc 片段 (580 bp),用 Taq DNA 聚合酶扩增
泳道 4、5、7、8: 人 c-myc 片段 (1.2kb),小鼠 β2-微球蛋白片段 (3.6kb)、牛溶菌酶基因片段 (6.9kb) 和人 tPA 基因片段 (9.3kb),均用扩增的高保真 PCR 系统扩增
泳道 6、9、10: 小鼠 α-② 胶原基因片段(5.6kb 和 10.4kb)与人 β-珠蛋白片段 (23kb),用扩增长模板 PCR 系统扩增
泳道 1,11: DNA 分子量标记物 VI 和 II
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
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12 - Non Combustible Liquids
WGK
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