usage
sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions
shelf life
≤18 mo.
feature
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR, dNTPs included, hotstart
packaging
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5620), kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5621)
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
genotyping: suitable, PCR: suitable
input
crude DNA
storage temp.
−20°C
General description
KAPA2G Fast HotStart®小鼠基因分型试剂盒包含KAPA Express Extract（一种新型热稳定蛋白酶）、缓冲系统（能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出颗粒剂用于PCR的DNA）以及含染料的KAPA2G快速基因分型混合物，其中，混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段，而传统方案则需要超过1天的时间。KAPA2G Fast基因分型混合物（2X）是一种即用型预混合液，其中包含用于快速PCR的所有组分和稳定剂，以及除引物和模板外的两种惰性染料。
Application
KAPA2G Fast HotStart®基因分型混合物已被用于：
- 基因组DNA提取和PCR预混液的制备
- 从小鼠尾巴、耳朵和脚趾组织中提取和扩增
- 其他动物组织DNA的提取和扩增
Biochem/physiol Actions
KAPA2G Fast基因分型混合物产生的DNA片段进行3′-dA-tailed处理，并可克隆进TA克隆载体，或用于常规下游分析或应用，包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样，KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性，但是没有3'→5'核酸外切酶（校正）活性。KAPA2G Fast的精确性与野生型Taq相近；错配率约为每结合1.7 x 105个核甘酸错配1次。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同，采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取，无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。
Features and Benefits
提高生产能力、周转时间时间和可靠性：
优于粗提取方法和商业试剂盒：
快速提示：
- PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
- 最低限度的处理，从而降低样本丢失或污染的风险
- 有充足模板用于多种测定；易于缩放，以处理 96 孔格式的样本
- 快速可靠地扩增各种扩增子长度和GC含量各异的DNA片段
优于粗提取方法和商业试剂盒：
- 周转时间增加
- 特异性增强
- 成本降低
快速提示：
- 15 分钟从小鼠尾、耳或趾组织中提取 PCR-ready DNA
- PCR 前在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0-8.5) 中稀释 DNA 提取物 10 倍，用 1μL DNA/25μL 反应。
- 提取液在-20℃ 下可稳定储存 6 个月以上。
- KAPA2G快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G快速DNA 聚合酶，以及缓冲液、MgCl2 (1.5 mM，1X) 和 dNTP (每种0.2 mM，1X)。
- 电泳上样染料包含在 KAPA2G 快速基因分型混合物中，可将 PCR 产物直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析。
- 对于 1 kb 的扩增子，使用 15 s 退火时间，15 s 延长时间；对于更长的扩增子，使用 15-30 s/kb 延长时间。
Packaging
- 2X KAPA2G 快速标准或热启动基因分型混合物（含染料）
有时干冰运输，某些地区的运输条件可能不同。
Preparation Note
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用（最长1个月）。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长3天）预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
Analysis Note
KAPA2G Fast HotStart Mouse Genotyping Kits 包含的所有组分均经过严格的质量控制检测，无污染的外切和内切酶活性，符合 DNA 污染的严格要求。
Other Notes
仅供研究使用。不不用于诊断操作。
Legal Information
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
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Warning
hcodes
Hazard Classifications
STOT SE 2
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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