usage
sufficient for 1000 reactions, sufficient for 200 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions
shelf life
≤12 mo.
feature
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR, dNTPs included: no, hotstart
packaging
pkg of 100 U (KK5522), pkg of 250 U (KK5515), pkg of 2500 U (KK5525), pkg of 500 U (KK5517)
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
PCR: suitable
input
crude DNA
storage temp.
−20°C
General description
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶的进化解决了广泛扩增子类型（富含 GC 和 AT）的不一致扩增。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒能够实现更高的过程性和比活性，这转化为稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性改善。KAPA2G 稳健 DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的 PCR 应用和困难的样本，无需使用多种酶和方案进行优化。
Application
KAPA2G Robust HotStart® PCR试剂盒已用于：
- 唾液样本的PCR扩增
- PCR扩增以便进行直接测序
- 巢式PCR
- 扩增富含 GC 或 AT 的模板
- 含有常见 PCR 抑制剂（例如，盐、尿素、SDS 或乙醇）的模板
- 粗制样本 PCR，例如口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
- 菌落 PCR
- RT-PCR
Biochem/physiol Actions
KAPA2G Robust HotStart® DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段相似。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶；错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。它可用于限制性内切酶消化、克隆和测序。同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶（校正）活性。
Features and Benefits
高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
菌落 PCR 中无与伦比的性能
快速注释：
- 在各种 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
- 提高 PCR 成功率
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
- 从粗样品中高效扩增
- 每单位酶的产量和灵敏度更高
菌落 PCR 中无与伦比的性能
- 来自大肠杆菌和酵母细胞的 PCR direct 产量更高，一致性更好
快速注释：
- KAPA2G Robust HotStart PCR Kit 包含 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶，设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
- 纯化的基因组 DNA 和粗样品（例如菌落 PCR）均可用作模板。
- 每 25μ 使用 0.5 UKAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶L 反应。更具挑战性的 PCR（GCrich，粗品）可能需要更高的酶浓度。
- 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
- KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl2 (1X)。
- 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl2 溶液添加额外的 MgCl2。
- KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
- 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
- KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR ( 70%GC)。
- KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用，尤其是用于富含 GC 的检测。
- 反应产物具有 3′-dA 尾式，可克隆至 TA 克隆载体。
Preparation Note
在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存4°C条件下（最长1个月）。长期储存时，应将试剂放回-20°C环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染，则在室温下（无意地）短时间（最多3天）放置，预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4°C下长期保存。请注意，储存在高于-20°C的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此在此温度下储存的风险由用户自负。
Analysis Note
每批 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶经确认含<2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA2G Robust HotStart PCR kits 经过严格的质量控制测试，没有污染的外切和内切核酸酶活性，满足 DNA 污染水平方面的严格要求。
Other Notes
仅用于研究目的。不用于诊断程序。
Legal Information
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
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仅试剂盒组分
产品编号
说明
- KAPA2G Robust Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL
- 5X KAPA2G Buffer A
- 5X KAPA2G Buffer B
- 5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2
- 5X KAPA Enhancer 1
- MgCl2 25 mM
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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does not flash
flash_point_c
does not flash
法规信息
常规特殊物品
低风险生物材料
此项目有
商品
An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.
全球贸易项目编号
| 货号 | GTIN |
|---|---|
| KK5525 | 04061834429753 |
| KK5522 | 04061834429739 |
| KK5517 | 04061834429708 |
| KK5515 | 04061838087140 |