usage
sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions
shelf life
≤12 mo.
feature
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR, dNTPs included, hotstart
packaging
pkg of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5704), pkg of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5705)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
2 ×
technique(s)
PCR: suitable
input
crude DNA
storage temp.
−20°C
General description
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 非常适合DNA片段的扩增。
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型（富含GC和AT的扩增子）扩增不一致的问题。该产品实现了更高的持续性和特异性活性，这意味着稳健的PCR性能、高灵敏度和对常见抑制剂的更高耐受性。KAPA2G Robust DNA聚合酶的高性能非常适合挑战性PCR应用和样本，避免了使用多种酶和方案进行优化。
Application
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 已用于：
- PCR
- 实时RT-PCR
- 巢式聚合酶链反应（nPCR）
- 扩增富含GC或AT的模板
- 含有常见PCR抑制剂（例如，盐、尿素、SDS或乙醇）的模板
- 粗制样本 PCR，例如，口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
- 菌落 PCR
- 血液PCR
- 哺乳动物DNA条形码
- 鱼类DNA条形码
- FFPE PCR
Biochem/physiol Actions
用KAPA2G Robust HotStart® DNA聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段具有相同特性，可用于限制性内切酶消化，克隆和测序等常规下游分析及应用。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶；错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶（校正）活性。
Features and Benefits
有效扩增富含GC和AT的靶标
改善对常见PCR抑制剂的耐受性
在菌落PCR中具有无与伦比的性能
快速注释：
- 在各种富含GC和AT的模板中表现稳健
- 提高PCR成功率
改善对常见PCR抑制剂的耐受性
- 从粗样本中有效扩增
- 每单位酶的产率和灵敏度更高
在菌落PCR中具有无与伦比的性能
- 在大肠埃希菌和酵母细胞直接PCR中具有更高的产量和更好的一致性
快速注释：
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PCR试剂盒包含KAPA2G Robust DNA聚合酶，专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
- 纯化的基因组 DNA 和粗制样品（例如菌落 PCR）均可用作模板。
- 每个循环的延长时间设置为15 sec/kb，对于困难扩增子或模板，增加到30-60 sec/kb。
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix含有1X的2 mM MgCl2。
- 带染料KAPA2G Robust HotStart ReadyMix包括两种惰性追踪染料，可直接上样到琼脂糖凝胶上。
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix是单方案PCR的理想选择，即使用单反应设置和循环方案扩增25-65%GC，至1 kb不等的片段。
- 反应产物是3′-dA尾的，可以克隆到TA克隆载体中。
Preparation Note
在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存4℃条件下（最长1个月）。长期储存时，应将试剂放回-20℃环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染，则在室温下（无意地）短时间（最多3天）放置，预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4℃下长期保存。请注意，储存在高于-20℃的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此在此温度下储存的风险由用户′自负。
Analysis Note
每批次KAPA2G Robust HotStart DNA聚合酶均已确认含有<2％的污染蛋白（Agilent Protein 230分析）。KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试，没有污染外源和内切酶活性，符合DNA污染水平的严格要求。
Other Notes
仅供研究使用。不用于诊断操作。
Legal Information
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
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仅试剂盒组分
产品编号
说明
- KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
- MgCl2 2mM at 1X
- dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
STOT SE 2
存储类别
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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