质量水平
用途
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
保质期
≤12 mo.
特点
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包装
pkg of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5704)
pkg of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5705)
制造商/商品名称
Roche
浓度
2 ×
技术
PCR: suitable
输入
crude DNA
储存温度
−20°C
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一般描述
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 非常适合DNA片段的扩增。
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型(富含GC和AT的扩增子)扩增不一致的问题。该产品实现了更高的持续性和特异性活性,这意味着稳健的PCR性能、高灵敏度和对常见抑制剂的更高耐受性。KAPA2G Robust DNA聚合酶的高性能非常适合挑战性PCR应用和样本,避免了使用多种酶和方案进行优化。
应用
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 已用于:
- PCR
- 实时RT-PCR
- 巢式聚合酶链反应(nPCR)
- 扩增富含GC或AT的模板
- 含有常见PCR抑制剂(例如,盐、尿素、SDS或乙醇)的模板
- 粗制样本 PCR,例如,口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
- 菌落 PCR
- 血液PCR
- 哺乳动物DNA条形码
- 鱼类DNA条形码
- FFPE PCR
生化/生理作用
用KAPA2G Robust HotStart® DNA聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段具有相同特性,可用于限制性内切酶消化,克隆和测序等常规下游分析及应用。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶;错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。同野生型Taq聚合酶一样,KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性,但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。
特点和优势
有效扩增富含GC和AT的靶标
改善对常见PCR抑制剂的耐受性
在菌落PCR中具有无与伦比的性能
快速注释:
- 在各种富含GC和AT的模板中表现稳健
- 提高PCR成功率
改善对常见PCR抑制剂的耐受性
- 从粗样本中有效扩增
- 每单位酶的产率和灵敏度更高
在菌落PCR中具有无与伦比的性能
- 在大肠埃希菌和酵母细胞直接PCR中具有更高的产量和更好的一致性
快速注释:
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PCR试剂盒包含KAPA2G Robust DNA聚合酶,专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
- 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
- 每个循环的延长时间设置为15 sec/kb,对于困难扩增子或模板,增加到30-60 sec/kb。
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix含有1X的2 mM MgCl2。
- 带染料KAPA2G Robust HotStart ReadyMix包括两种惰性追踪染料,可直接上样到琼脂糖凝胶上。
- KAPA2G Robust HotStart ReadyMix是单方案PCR的理想选择,即使用单反应设置和循环方案扩增25-65%GC,至1 kb不等的片段。
- 反应产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。
制备说明
在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存4℃条件下(最长1个月)。长期储存时,应将试剂放回-20℃环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染,则在室温下(无意地)短时间(最多3天)放置,预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4℃下长期保存。请注意,储存在高于-20℃的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在此温度下储存的风险由用户′自负。
分析说明
每批次KAPA2G Robust HotStart DNA聚合酶均已确认含有<2%的污染蛋白(Agilent Protein 230分析)。KAPA2G Robust HotStart ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试,没有污染外源和内切酶活性,符合DNA污染水平的严格要求。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
- MgCl2 2mM at 1X
- dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X
警示用语:
Warning
危险声明
危险分类
STOT SE 2
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
常规特殊物品
此项目有
Akiko Suzuki et al.
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Bovine leukaemia virus (BLV) causes chronic lymphoproliferative disorder and fatal lymphosarcoma in cattle, leading to significant economic losses in the beef and dairy industries. BLV is endemic globally and eleven genotypes have been identified. To date, only Zambian isolates have
Pedro P C Souza et al.
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Cytokines produced by inflammatory or resident mesenchymal cells play important modulatory roles in the pathogenesis of inflammation induced bone loss. In the present study, the effects of IL-4 and IL-13 on the expression of three osteotropic cytokines in the IL-6
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Molecular biology reports, 47(12), 9499-9509 (2020-11-26)
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商品
An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.
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