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RAP-RO

Roche

rAPid碱性磷酸酶

1 units/μg protein, optimum reaction temp. 37 °C

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别名:
碱性磷酸酶，dna片段克隆
EC 号:
3.1.3.1 (BRENDA, IUBMB)

生物来源

bovine intestine

质量水平

100

重组

expressed in Pichia pastoris

形式

liquid

比活

1 units/μg protein

分子量

monomer 56  kDa by SDS-PAGE

包装

pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl])
pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])

制造商/商品名称

Roche

浓度

<0.1 % (w/w)

参数

37 °C optimum reaction temp.

技术

molecular cloning: suitable

颜色

colorless

pH值（酸碱度）

7.6-8.5 (68 °F)

溶解性

water: miscible

适用性

suitable for molecular biology

NCBI登记号

QBZ39068

UniProt登记号

P09487

P09487

应用

life science and biopharma

异质活性

Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C)
unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)

储存温度

−20°C

基因信息

bovine ... ALPI(280993)

相关类别

一般描述

rAPid碱性磷酸酶是从牛肠中分离的碱性磷酸酶，作为在毕赤酵母（Pichia Pastoris）中表达的56kD重组酶提供。重组形式确保了一致性和安全性。rAPid碱性磷酸酶能够催化DNA和RNA、核苷酸和蛋白质的5′磷酸盐的去磷酸化。碱性磷酸酶处理可去除连接酶所需的5′-磷酰基末端，从而防止DNA片段的自我连接；该特性能够减少载体背景，对于克隆策略非常重要。与小牛肠道磷酸酶不同，rAPid碱性磷酸酶在+75 °C下热处理2分钟，可快速、完全且不可逆地灭活。因此，它是虾碱性磷酸酶的出色替代品。此外，该酶在限制酶缓冲液中具有活性。因此，无需纯化步骤，即可完成限制酶消化、去磷酸化、酶失活、连接或5′-末端标记。

特异性

碱性磷酸酶可以催化许多磷酸酯的水解，如伯醇和仲醇、糖、环醇、酚和胺的酯。与磷酸二酯不反应。该酶能水解无机焦磷酸盐。酶的动力学性质取决于许多因素，如酶的纯度、测定中酶的浓度、缓冲液、pH等。
热灭活：通过在75℃温育2分钟，可以灭活rAPid碱性磷酸酶。

应用

  • rAPid碱性磷酸酶可用于许多应用，包括：从核酸中去除5′-磷酰基
  • 制备用于5′-末端标记的模板
  • 去除dNTP，净化PCR产物
  • 蛋白质的去磷酸化
注意：通过在75℃温育2分钟，可以非常快速地灭活rAPid碱性磷酸酶。在限制性酶切和去磷酸化后不需要其他纯化步骤。去磷酸化的DNA可直接用于连接反应。
注意：快速DNA去磷酸化和连接试剂盒也包含rAPid碱性磷酸酶，该试剂盒能够快速有效地完成去磷酸化并连接粘性或钝端DNA片段。使用这种方便的试剂盒，在+37 °C下可在10分钟内对钝端和粘性5′-突出末端进行去磷酸化，并在+15–25 °C下仅需5分钟即可内完成连接。

特点和优势

  • 消除污染风险：重组表达以及可靠且灵敏的质量控制测试确保了高纯度。
  • 用经济的解决方案替代当前的磷酸酶：rAPid碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶或牛碱性磷酸酶等价。
  • 消除动物源性疾病的风险：在毕赤酵母（Pichia pastoris ）中表达，可确保一致性和安全性。
  • 快速热灭活的优势：仅需在75℃温育2分钟，即可灭活rAPid碱性磷酸酶。
  • 获得一致的性能：与其他碱性磷酸酶相比，rAPid碱性磷酸酶在储存期间具有出色的稳定性。

包装

1个试剂盒包含2个组分

质量

根据当前的质量控制程序，对所有批次的rAPid碱性磷酸酶进行测试，确保其不含脱氧核糖核酸酶和切割活性。

单位定义

一个rAPid碱性磷酸酶活性单位是指在检测条件下，在+ 37℃，1分钟内水解1 mol 4-硝基苯基磷酸酶所需的酶量。

体积活度：1 U/μl

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

仅试剂盒组分

产品编号
说明
  • rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
  • rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

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