生物来源
bovine intestine
质量水平
重组
expressed in Pichia pastoris
表单
liquid
比活
1 units/μg protein
分子量
monomer 56 kDa by SDS-PAGE
包装
pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl])
pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])
制造商/商品名称
Roche
浓度
<0.1 % (w/w)
参数
37 °C optimum reaction temp.
技术
molecular cloning: suitable
颜色
colorless
pH值（酸碱度）
7.6-8.5 (68 °F)
溶解性
water: miscible
适用性
suitable for molecular biology
NCBI登记号
UniProt登记号
应用
life science and biopharma
异质活性
Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C)
unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)
储存温度
−20°C
基因信息
bovine ... ALPI(280993)
一般描述
rAPid碱性磷酸酶是从牛肠中分离的碱性磷酸酶，作为在毕赤酵母（Pichia Pastoris）中表达的56kD重组酶提供。重组形式确保了一致性和安全性。rAPid碱性磷酸酶能够催化DNA和RNA、核苷酸和蛋白质的5′磷酸盐的去磷酸化。碱性磷酸酶处理可去除连接酶所需的5′-磷酰基末端，从而防止DNA片段的自我连接；该特性能够减少载体背景，对于克隆策略非常重要。与小牛肠道磷酸酶不同，rAPid碱性磷酸酶在+75 °C下热处理2分钟，可快速、完全且不可逆地灭活。因此，它是虾碱性磷酸酶的出色替代品。此外，该酶在限制酶缓冲液中具有活性。因此，无需纯化步骤，即可完成限制酶消化、去磷酸化、酶失活、连接或5′-末端标记。
特异性
碱性磷酸酶可以催化许多磷酸酯的水解，如伯醇和仲醇、糖、环醇、酚和胺的酯。与磷酸二酯不反应。该酶能水解无机焦磷酸盐。酶的动力学性质取决于许多因素，如酶的纯度、测定中酶的浓度、缓冲液、pH等。
热灭活：通过在75℃温育2分钟，可以灭活rAPid碱性磷酸酶。
热灭活：通过在75℃温育2分钟，可以灭活rAPid碱性磷酸酶。
应用
- rAPid碱性磷酸酶可用于许多应用，包括：从核酸中去除5′-磷酰基
- 制备用于5′-末端标记的模板
- 去除dNTP，净化PCR产物
- 蛋白质的去磷酸化
注意：快速DNA去磷酸化和连接试剂盒也包含rAPid碱性磷酸酶，该试剂盒能够快速有效地完成去磷酸化并连接粘性或钝端DNA片段。使用这种方便的试剂盒，在+37 °C下可在10分钟内对钝端和粘性5′-突出末端进行去磷酸化，并在+15–25 °C下仅需5分钟即可内完成连接。
特点和优势
- 消除污染风险：重组表达以及可靠且灵敏的质量控制测试确保了高纯度。
- 用经济的解决方案替代当前的磷酸酶：rAPid碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶或牛碱性磷酸酶等价。
- 消除动物源性疾病的风险：在毕赤酵母（Pichia pastoris ）中表达，可确保一致性和安全性。
- 快速热灭活的优势：仅需在75℃温育2分钟，即可灭活rAPid碱性磷酸酶。
- 获得一致的性能：与其他碱性磷酸酶相比，rAPid碱性磷酸酶在储存期间具有出色的稳定性。
包装
1个试剂盒包含2个组分
质量
根据当前的质量控制程序，对所有批次的rAPid碱性磷酸酶进行测试，确保其不含脱氧核糖核酸酶和切割活性。
单位定义
一个rAPid碱性磷酸酶活性单位是指在检测条件下，在+ 37℃，1分钟内水解1 mol 4-硝基苯基磷酸酶所需的酶量。
体积活度：1 U/μl
体积活度：1 U/μl
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
- rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
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