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Merck
CN

API-RO

Roche

碱性磷酸酶 (AP)

grade I, from calf intestine

别名:

AP, 碱性磷酸酶

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关于此项目

UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
Biological source:
bovine (calf) intestine
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biological source

bovine (calf) intestine

form

suspension

packaging

pkg of 1,500 U (10108138001), pkg of 7,500 U (10108146001)

manufacturer/tradename

Roche

optimum pH

8.0-10.5

absorption

7.6 at 278 nm (10 mg AP/ml)

storage temp.

2-8°C

General description

37℃,以4-硝基苯基磷酸酯为底物,二乙醇胺为缓冲液(25℃,以4-硝基苯磷酸酯为底物,甘氨酸为缓冲液,400 U/mg);
正磷酸单酯磷酸水解酶(碱性最佳)
碱性磷酸酶催化从磷酸化的各种化合物中除去磷酸基团。它水解 DNA 和 RNA 中的 5′-单磷酸酯基团。它还可以从 RNA 中水解 5′-二磷酸和 5′-三磷酸基团。

Application

从寡核苷酸和蛋白质核苷酸交换和释放中选择性切割末端磷酸基团。它还用于磷酸化样品,以区分磷酸酯部分(以磷酸化聚糖形式存在)和磷酸化氨基酸残基。

Biochem/physiol Actions

热失活:AP 活性通过在 65°C 温育被不可逆转地破坏。
去饱和取决于蛋白质浓度 - 使用低于 10 U/ml(0.1 mol/l 甘氨酸缓冲液,pH 10.5,1 mmol/l MgCl2 和 0.1 mmol ZnCl2) ,AP 在 65℃ 孵育 10 分钟后失活。

Physical form

悬浮液,溶剂为 3.2M 硫酸铵溶液,含有 1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,pH 约 7

Preparation Note

  • 活化剂:二价金属离子(Mg2+、Co2+、Mn2+
  • 氨基醇(2-氨基-2-甲基-1-丙醇,二乙醇胺)

注意,高浓度的氨基醇也可以作为竞争性抑制剂(例如二乙醇胺中的单乙醇胺)。

储存条件(工作溶液):悬浮液的浓度 = 约 5 mg/ml。
如果再用含有 1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,pH 约为 7 的 3.2 M 硫酸铵溶液,稀释该悬浮液仅 5 至 10 倍,从一般经验看来,如果将其储存在 4°C,可能稳定几周(不保证!)。

Analysis Note

污染物: PDE <0.0004%,ADA 和 A-5-MP 脱氨酶 <0.004%

Other Notes

单位转换:1 Roche 单位(在 +25°C 下测试)对应约 2 至 2.5 Sigma 单位(在 +37°C 下测试)。
AP 活性不以阿姆斯壮单位表示;国际单位的转换系数尚不清楚。
约 3.8 U(I 级 AP)或 4.0 U(II 级 AP)[+37°C,4-NPP 作为底物,二乙醇胺作为缓冲液,pH 9.8] = 1 U [+25°C,4-NPP 作为底物,甘氨酸作为缓冲液,pH 10.5]。

生化信息。 87(I 级 AP):
1.0 U [+37℃,QC 测定条件] = 0.79 U [+ 30℃,QC 测定条件] = 0.57 U [+25℃,QC 测定条件]
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
AP 是相同或几乎相同的亚基的二聚体;每一个都包含 2 个 Zn2+ 分子,一个紧密结合,且是结构稳定所必需的,另一个是松散结合的,且是催化活性所必需的。活性位点含有反应性丝氨酸。
在一些哺乳动物(例如人)中,至少存在 3 种可区分的同工酶:肠、胎盘,以及在骨/肝/肾中发现的形式。


存储类别

12 - Non Combustible Liquids

wgk

WGK 1

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法规信息

动植物源性产品
低风险生物材料

此项目有



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实验方案

Alkaline phosphatase (AP) is a non-specific phosphomonoester hydrolase that catalyzes the hydrolysis of a wide variety of organic monophosphates.


METHOD SUMMARY
Stephanie Ketcham
Biotechniques, 117-123 (2017)
O Brenna et al.
The Biochemical journal, 151(2), 291-296 (1975-11-01)
A crude preparation of alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1) from calf intestinal mucosa was purified by affinity chromatography on Sepharose-bound derivatives of arsanilic acid, which was found to be a competitive inhibitor of the enzyme. Three biospecific adsorbents were prepared for
Raphael Gasper et al.
Small GTPases, 1(3), 133-141 (2011-06-21)
The Ras family is the largest and most diverse sub-group of Ras-like G proteins. This complexity is further increased by the high number of regulatory Guanine nucleotide Exchange Factors (GEFs) and GTPase Activating Proteins (GAPs) that target specific members of



全球贸易项目编号

货号GTIN
1010813800104061838666918
1010814600104061838250490