胶原酶B

通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干从溶组织梭菌培养物制备胶原酶B。来自溶组织梭菌的胶原酶是一种胶原分解酶。它与胶原蛋白样物质相互作用，负责将胶原蛋白降解成小肽。它广泛用于分解许多类型的组织（如肺，心脏，肌肉，骨骼，脂肪组织，肝脏，肾脏，软骨，乳腺，胎盘，血管，脑，肿瘤）和单一的准备——用于建立原代细胞培养系统的细胞悬浮液。当产量和活力很重要时，建议使用胶原酶B。

来自 Roche的梭菌胶原酶已用于制备来自许多类型组织的细胞，例如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。然而，每批酶对于破坏特定细胞的适合性。组织应根据经验确定。
胶原酶B已用于制备来自小鼠主动脉和结肠直肠癌组织的细胞。

胶原酶降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。

酶活性：
胶原酶活性：>0.15U/mg（根据Wünsch）（+ 25℃，4-苯基 - 偶氮苄基 - 氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物）
污染酶活性：胰蛋白酶，梭菌蛋白酶和总量蛋白水解活性
胶原酶B 具有正常至高的胶原酶活性和高于平均的梭菌蛋白酶活性（通常 > 10U/mg）。

抑制剂：
胶原酶抑制剂：EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-巯基乙醇
胶原酶不受血清抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂：TLCK
胰蛋白酶抑制剂：抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂（蛋清，大豆）、血清

激活剂：Ca²⁺
工作浓度：0.5至2.5 mg/ml
储存条件（工作溶液）：-15至-25°C
Roche 建议仅重悬立即使用所需的冻干量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了，所以要避免反复冻融。

在任何平衡盐溶液（例如HBSS）中重悬

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

来自 Roche的胶原酶以Wünsch单位进行测定（每分钟在+ 25°C下用 Wünsch 底物形成 1 μmol 产物）。
通常，胶原酶活性以 Mandl 单位给出（在+ 37℃ 下 5 小时内从胶原释放的1 μmol 亮氨酸）。
遗憾的是，两个活性单位之间没有一致的转换因子，因为Mandl 单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度，这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂实际上在Mandl单元中比粗制剂具有更低的比活性。梭菌制剂通常给出约 1：1800的转换因子（例如，特定批次的梭菌胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg）。