Merck
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MGKITKB

Roche

KAPA 小鼠基因分型试剂盒

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别名:
基因分型
NACRES:
NA.55

用途

sufficient for 100 reactions (KK7301)
sufficient for 500 reactions (KK7302)

质量水平

保质期

≤18 mo.

特点

dNTPs included
hotstart: no

制造商/商品名称

Roche

技术

PCR: suitable
genotyping: suitable

输入

crude DNA

储存温度

−20°C

一般描述

KAPA HotStart小鼠基因分型试剂盒含KAPA 快速提取酶(一种新型热稳定蛋白酶)、缓冲体系(能够在短短15分钟内从小鼠组织提取出PCR就绪的DNA)和含染料的KAPA2G快速基因分型混合物(所含DNA聚合酶通过定向优化技术改造,具有高持续性,作用速度快)。KAPA 快速提取酶和KAPA2G快速基因分型混合物结合使用可在短至1小时内可靠地从小鼠组织中提取和扩增DNA片段,而传统方案则需要 ≥1天的时间。KAPA2G快速基因分型混合物(2X)是随时可用的主混合物,包含除引物和模板以外所有用于快速PCR的组分。

应用

KAPA 小鼠基因分型试剂盒用于小鼠尾部、耳部以及趾组织 DNA 的提取和扩增。此试剂盒也适用于从其他动物组织提取和扩增DNA,但可能需要优化操作方案。

生化/生理作用

用 KAPA2G 快速基因分型混合物(KAPA2G Fast Genotyping Mix)产生的DNA片段带3'-dA-尾,可克隆至 TA 克隆载体,或用于限制性内切酶消化、克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样,KAPA2G Fast 含有5'→3'聚合酶和5'→3'核酸外切酶活性,但没有3'→5'核酸外切酶(校对)活性。 KAPA2G Fast的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。

特点和优势

提高生产能力、周转时间和可靠性:
  • PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
  • 最低限度的处理,从而降低样本丢失或污染的风险
  • 有充足模板用于多种测定;易于缩放,以处理 96 孔格式的样本
  • 快速可靠地扩增各种扩增子长度和 GC 含量各异的 DNA 片段

优于粗提取方法和商业试剂盒:
  • 增加周转时间 增加特异性 降低成本

简要说明:
  • 15 分钟内即可从小鼠尾部、耳朵或趾组织中提取 PCR就绪 DNA,
  • 进行 PCR 前,将 DNA 提取液在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0–8.5) 中稀释 10 倍,每25 μL反应用 1 μLDNA。
  • 提取液在-20℃ 下可稳定储存 >6 个月。
  • KAPA2G 快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G 快速 DNA 聚合酶、缓冲液、MgCl2 (1.5 mM,1X) 和 dNTP (每种 0.2 mM,1X)。
  • KAPA2G 快速基因分型混合物中包含电泳上样染料,可将 PCR 产物直接上样至琼脂糖凝胶进行分析。
  • 对于 <1 kb 的扩增子,采用 15 s的退火时间和15 s 的延长时间;对于更长的扩增子,采用 15-30 s/kb 的延长时间。

质量

KAPA 小鼠基因分型试剂盒中包含的所有组分均经过严格的质量控制检测,不含污染性的外切和内切核酸酶活性,符合关于DNA污染水平的严格要求。

制备说明

使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染,试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。

其他说明

仅供研究使用。不用于诊断操作。

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • 2X KAPA2G Fast Standard or HotStart® Genotyping Mix with dye

  • KAPA Express Extract 1 U/μL

  • 10X KAPA Express Extract Buffer

象形图

Health hazard

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

STOT SE 2

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

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Skin integrity is essential for protection from external stress and trauma. Defects in structural proteins such as keratins cause skin fragility, epitomized by epidermolysis bullosa (EB), a life-threatening disorder. Here we show that dominant mutations of KLHL24, encoding a cullin
Siavash Ghaffari et al.
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Stéphane Dalle et al.
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An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.

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