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Merck
CN

WESTBL-RO

Roche

蛋白印迹封闭试剂,溶液

solution, sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm2]), sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm2])

别名:

蛋白印迹封闭液

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About This Item

UNSPSC代码:
12352200

形式

solution

质量水平

用途

sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm2])
sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm2])

包装

pkg of 100 mL (11921673001)
pkg of 6 × 100 mL (11921681001)

制造商/商品名称

Roche

储存温度

2-8°C

应用

在蛋白质印迹实验和免疫荧光染色期间,Western Blocking Reagent可用作通用封闭液。该试剂用于膜封闭、膜洗涤和稀释检测抗体等步骤中。

质量

每个批次都经过功能测试(斑点印迹)。

外形

Western Blocking Reagent(Western 封闭液)是一种 10x 浓缩液,它含有 10% 纯化的酪蛋白,溶解于马来酸缓冲液中。

制备说明

工作溶液:制备工作溶液

  • Tris 缓冲液(TBS),pH 7.5
在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱(50mM)和 8.76g 氯化钠(150mM),并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8°C 下,TBS 可稳定储存 3 个月。
注意:叠氮化钠对 POD 有抑制作用,因此在使用 POD 复合物时,不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

  • TBS-Tween(TBST)
洗涤缓冲液 1:将 1 ml Tween 20 溶于 1L TBS 中。在 2-8°C 下,TBST 可稳定储存 3 个月。
注意:0.1% Tween 20 适用于大多数应用,但具体取决于所用的膜和抗体 - 不同的表面活性剂(如SDS、Triton X-100 和 Nonidet P40),以及表面活性剂浓度在 0.01 至 1% 之间可以产生更好的结果。

  • 封闭液(1%)
使用 90ml TBS 稀释 10ml Western 封闭液(10x 浓缩液)。在 2-8°C 下,封闭液可储存 1 个月。
注意:叠氮化钠对 POD 有抑制作用,因此在使用 POD 复合物时,不得将叠氮化钠用作抗菌剂。

  • 封闭液(0.5%)
使用 50ml TBS 溶液稀释 50ml 封闭液(1%)。

  • 抗体溶液
所有抗体的稀释液和孵育液是封闭液(0.5%)(用 TBS 溶液稀释)(见上文)。为了让检测效果达到最佳状态,我们建议在进行蛋白质印迹实验之前,先优化一抗和二抗的稀释浓度。(首先使用稀释 3 至 4 倍的一抗和恒定浓度的二抗。然后选择最合适的一抗稀释液,并以相同的方式优化二抗浓度。)
注意:封闭液的浓度是改善蛋白质印迹信噪比的重要参数。如果优化了抗体浓度之后,背景仍然较高,则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度从 0.5% 增加至 1%。如果即便延长了抗体孵育时间,信号仍然较弱,则在抗体孵育和洗涤步骤期间将封闭液的浓度也从 0.5% 降低至 0.1%。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

动植物源性产品

分析证书(COA)

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