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文件

安全信息

C1889

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

0.2 μm filtered, suitable for release of physiologically active rat hepatocytes, Type IV-S, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

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别名:
梭菌肽酶 A
CAS号:
9001-12-1
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC 号:
232-582-9
MDL编号:
MFCD00130830
NACRES:
NA.54

质量水平

200

无菌性

0.2 μm filtered

类型

Type IV-S

形式

powder

比活

≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

适用性

suitable for release of physiologically active rat hepatocytes

应用

diagnostic assay manufacturing

储存温度

−20°C

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一般描述

溶组织梭菌含有两种胶原酶，可剪切胶原酶三螺旋不同的切割位点。切割效率比哺乳动物胶原酶更高。梭菌胶原酶与气性坏疽的细菌侵袭有关。

应用

胶原酶已被用于制备动脉组织，用于研究晚期糖基化终产物（AGE）。该酶还与其他蛋白酶一起用于人肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮和许多其他组织的解聚。它在肝脏和肾脏灌注研究，胰腺消化和非实质肝细胞的分离中也是有效的。当测试该酶是否适合释放肝细胞时。对于每只大鼠肝脏，胶原酶以约 1mg/mL 使用，总体积为 100mL。
胶原酶（源于溶组织梭菌）用于解离组织样本，如脾脏和睾丸组织。

生化/生理作用

从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。胶原酶被每克摩尔酶 4 克原子钙（Ca2+）活化。培养滤液被认为含有至少 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa（最适 pH 值：6.3-8.8）。该酶通常用于消化组织样品中的结缔组分以释放单个细胞。胶原酶治疗可导致一些细胞死亡。通常，用于消化的浓度为 0.1 至 5mg/mL。反应持续时间从 15 分钟到几小时不等，这使得能够有效地解离细胞而不会导致过多的细胞死亡。具有钙和 BSA 的 Krebs Ringer 缓冲液是优选的，并且 Zn2+ 是其活性所必需的。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

注意

根据提供，该产品在 -20°C 下，可稳定保存一年。在 37℃、50℃ 和 -20℃ 下，30 天内 FALGPA 或蛋白酶活性没有损失。如果以等分试样（10mg/mL）快速冷冻，并且在 -20℃ 下冷冻，则粗胶原酶的溶液是稳定的。进一步的冻融循环会损坏溶液。 当在冰上保持时，该产品在 7 小时内保持 100％ 活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

从 IV 型（C5138）制备。可以通过在 37℃ 下，将 0.05-0.1mg/mL 胶原酶溶解在含有 0.36mM 氯化钙（TESCA）（pH 7.4）的 50mM TES 缓冲液中来制备储备溶液。该产品还含有梭菌蛋白酶，非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。

象形图

Health hazard
GHS08

警示用语：

Danger

危险声明

H334

预防措施声明

P261 - P284 - P501

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

常规特殊物品

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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