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安全信息

C2399

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

0.2 μm filtered, high purity, purified by chromatography, Type VII-S, ≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

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别名:
梭菌肽酶 A
CAS号:
9001-12-1
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC 号:
232-582-9
MDL编号:
MFCD00130830
NACRES:
NA.54

质量水平

200

无菌性

0.2 μm filtered

形式

lyophilized powder

比活

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

纯化方式

chromatography

溶解性

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

储存温度

−20°C

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应用

来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于：
  • 诱发小鼠脑出血（ICH）
  • 消化3D胶原蛋白凝胶以进行免疫荧光分析
  • 引起小鼠局灶性血液外渗和出血

胶原酶已用于动脉组织的制备，用于晚期糖基化终产物 (AGE) 的研究。该酶还与其他蛋白酶一起使用，用于人体肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮等多种组织的解聚。在肝脏和肾脏灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离中也有效。

生化/生理作用

组织溶梭菌包含两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶可参与气体坏疽中的细菌入侵。
有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca2+) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa（最适用 pH：6.3-8.8）。该酶识别序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-，其中 X 是最常见的中性氨基酸。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

由 VII (C0773) 型制备。在 37℃ 下，将 0.05-0.1 mg 胶原酶溶于 1 mL 含 0.36 mM 氯化钙 (TESCA) 的 50 mM TES 缓冲液 (pH 7.4) 中，制备贮备液。

底物

产品编号
说明
价格

象形图

Health hazard
GHS08

警示用语：

Danger

危险声明

H334

预防措施声明

P261 - P284 - P501

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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