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Merck
CN

C2799

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

powder, suitable for cell culture, ≥4 FALGPA units/mg solid, high purity, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

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别名:
梭菌肽酶 A
CAS号:
EC 号:
MDL编号:
UNSPSC代码:
12352204
NACRES:
NA.75

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

形式

powder

比活

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

分子量

68-130 kDa

纯化方式

chromatography

技术

cell culture | mammalian: suitable

pH值(酸碱度)

7.4

异质活性

neutral protease and clostripain ≤1 unit/mg solid

运输

dry ice

储存温度

−20°C

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应用

用于消化胶原蛋白并从基质中释放贴壁细胞。
该产品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。研究表明,它适用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞分离和肝细胞制备。胶原酶也用在糖基化终末产物的研究中制备动脉组织。经测试,该酶以约 1mg/mL 的浓度消化肝细胞。消化浓度范围为 0.1 至 5 mg/mL。

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产物是 C. histolyticum分泌的酶混合物,可通过分泌酶中10-18个组分的相对比率来区分不同的产物。 其主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶、和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞均是必需的。 各种类型的胶原蛋白都是胶原酶的天然底物。

注意

未开封的产品可在-20°C下稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下储存30天,FALGPA或蛋白酶活性无损失。如果将粗制胶原酶溶液分装(10 mg/mL)后快速冷冻并冷藏在-20℃下,可稳定保存。后续的冻融循环将破坏溶液。若将本品放在冰上,可在7小时内保持100%活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

这种胶原酶是从 VII 型(C0773)溶组织性梭菌培养滤液中获得的。人们认为该培养滤液含有至少 7 种分子量为 68-130kDa 的不同蛋白酶。通常使用 TESCA 缓冲液(含有 50 mM TES,0.36 mM 氯化钙,pH 7.4,37℃)以 1-2 mg/mL 制备溶液。

象形图

Health hazardExclamation mark

警示用语:

Danger

危险分类

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

靶器官

Respiratory system

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

常规特殊物品

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Discover pre-mixed collagenase enzyme blends with DNase I, Dispase II, Elastase, and Hyaluronidase and gently dissociate animal tissues in vitro.

实验方案

在测定胶原酶活性时,使用N-(3-[2-呋喃基]丙烯酰基)-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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