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C9407

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

powder, Suitable for the digestion and isolation of physiologically active pancreatic islet cells, suitable for cell culture

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别名:
梭菌肽酶 A
CAS号:
9001-12-1
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC 号:
232-582-9
MDL编号:
MFCD00130830
NACRES:
NA.75

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

200

形式

powder

specific activity

≥800 units/mg solid

分子量

68-130 kDa

包装

pkg of 1 μmol

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

pH值（酸碱度）

7.4

储存温度

−20°C

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一般描述

来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶具有胶原蛋白结合结构域（CBD）和多囊肾病样（PKD样）结构域。它还具有用于钙的Ca 2+结合位点，这对于其功能至关重要。胶原酶用于治疗结缔组织疾病，Dupuytren挛缩。

应用

来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶已被用于消化：
  • 用于胰岛分离的胰腺样品
  • 用于分离肺血管平滑肌细胞（PBMC）的肺动脉样品
  • 用于分离软骨细胞的软骨样品

该产品适用于人类肿瘤，小鼠肾脏，人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织，以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于（浓度约为1mg/ml）对肝细胞的释放进行检测。 消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物，分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

注意

本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天，其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品（ 10 mg/mL）经快速冷冻可保持稳定，并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时，可保留100％活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

该产品从Clostridium histolyticum，XI型胶原酶中获得。它具有梭菌蛋白酶，非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。溶液通常是在TESCA缓冲液（含有50mM TES、0.36mM氯化钙，37℃时pH 7.4）中按1-2 mg/mL进行制备。

底物

产品编号
说明
价格

象形图

Health hazard
GHS08

警示用语：

Danger

危险声明

H334

预防措施声明

P261 - P284 - P501

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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