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C9697

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution), suitable for cell culture

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别名:
梭菌肽酶 A
CAS号:
9001-12-1
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC 号:
232-582-9
MDL编号:
MFCD00130830

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

200

无菌性

0.2 μm filtered

形式

lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution)

specific activity

≥800 units/mg solid

分子量

68-130 kDa

浓度

1 mg/mL

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

pH值（酸碱度）

7.4

储存温度

−20°C

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一般描述

胶原酶是一种蛋白酶，可切割被称为胶原蛋白的三螺旋蛋白。组织胶原酶有三种类型，它们属于基质金属蛋白酶（MMP）家族。来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum）的胶原酶具有非常强的活性，可在低至4-10℃的温度下从两端消化胶原蛋白。粗制胶原酶混合物主要含有两种的酶，即胶原酶和梭菌蛋白酶。

应用

来自溶组织梭菌（ Clostridium histolyticum ）的胶原酶被用于以下应用：

  • 足细胞分离
  • 用于酶催化法的对比
  • 用于免疫细胞化学的组织制备
  • 睾丸精子提取
  • 制备单细胞悬浮液
  • 免疫荧光法

本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化以及肝细胞制备。胶原酶也已用于制备动脉组织，以对晚期糖基化终产物进行研究。该酶用于（浓度约为1mg/ml）对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是溶组织梭菌（Clostridium histolyticum）分泌的酶混合物，不同的产品可通过分泌酶中10-18种组分的相对比例进行区分。主要成分是两种胶原酶，即梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞来说都是必需的。各种类型的胶原蛋白均是胶原酶的天然底物。

注意

未开封的产品可在-20°C下稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下储存30天，FALGPA或蛋白酶活性无损失。如果将粗制胶原酶溶液分装（10 mg/mL）后快速冷冻并冷藏在-20℃下，可稳定保存。后续的冻融循环将破坏溶液。若将本品放在冰上，可在7小时内保持100%活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

将XI型胶原酶以1-2 mg/mL溶于TESCA缓冲液（含有50mM TES，0.36mM氯化钙，pH 7.4，37℃）制备胶原酶溶液。

象形图

Health hazard
GHS08

警示用语：

Danger

危险声明

H334

预防措施声明

P261 - P284 - P501

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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