U2OS细胞GFP-NUP98

U2OS GFP-NUP98是一种来自15岁白人女性的骨骨肉瘤细胞，其具有ZFN修饰，可从内源NUP98基因座表达GFP-NUP98转基因。

该细胞系来源于ATCC目录号HTB-96。

U2OS细胞已被用于使用Alamar Blue和活细胞成像对细胞增殖进行评估。本品是一种人U2OS细胞系，其中的基因组NUP98基因已经以内源性标记3XFLAG^™表位和绿色荧光蛋白 (GFP) 基因采用CompoZr^®锌指核酸酶技术标记。 整合导致了融合蛋白的内源性表达，其中的3XFLAG连接GFP的N末端，GFP连接NUP98的N末端。荧光成像显示特征性NUP98核表达。这种稳定的细胞系通过单次克隆扩增。与通过外源性启动子过度表达的细胞系相比，靶蛋白基因调节和相应的蛋白功能得到保留。

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锌指核酸酶（ZFN）介导的荧光GFP标签的靶向整合恰好位于染色体11p15.4上的NUP98基因的起始密码子后面，以产生在蛋白N末端标记有GFP的转基因稳定表达的细胞系。

U2OS细胞是贴壁生长，倍增时间约为29个小时。

每周进行两到三次的培养基更新。

在37°C水浴中轻轻摇晃（约2分钟），并将小瓶盖保持在水面上，以快速解冻小瓶。用70％乙醇去污，并加入9mL培养基并离心125×g（5-7分钟）。重悬于完全培养基中并在37℃，5％CO2气体中孵育。

继代培养比例：约1：3-1：6

该细胞系的基础培养基是 McCoy′s 5A改良培养基（货号M9309）。为了制备完全生长培养基，需在基础培养基中加入以下成分：胎牛血清（货号F4135），最终浓度为10％（v/v）。

细胞冷冻培养基-DMSO 1X， 目录号C6164。

经检测可用于支原体、不育、冷冻后活力、用于细胞系鉴定的短末端重复（STR）分析、用于细胞系物种确认的细胞色素氧化酶I（COI）分析。

3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

CompoZr is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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