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Merck
CN

CRISPR08

Sigma-Aldrich

CRISPR UNIVERSAL NEGATIVE CONTROL 3

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UNSPSC代码:
41106609
NACRES:
NA.51

形式

liquid

质量水平

包装

vial of 50 μL

浓度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

应用

CRISPR

运输

dry ice

储存温度

−20°C

一般描述

通用CRISPRs阴性对照被设计为不能被人类,小鼠或大鼠基因组识别。单个载体形式包括Cas表达盒和gRNA序列。GFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对细胞群落进行富集。

应用

Functional Genomics/Target Validation
  • Creation of gene knockouts in cell lines
  • Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes

特点和优势

无需特定的靶向CRISPR/Cas9 系统,即可表达Cas9和GFP。

组分

1 管包含1μg 表达非靶向向导序列的U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒。

原理

CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统,可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。

外形

Sigma U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒表达非靶向的向导序列,以浓度 20ng/μl in 50μl的溶液形式提供。

制备说明

Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装,可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果,我们建议在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。

其他说明

文献中使用的标准转染浓度范围为2~8μg的单个的表达向导RNA和Cas9的载体。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)

法律信息

CRISPR专利正在申请中

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

常规特殊物品

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Michelle Bhatt et al.
Oncotarget, 8(7), 10905-10918 (2016-12-31)
Cisplatin (cis-Pt) resistance in tumor cells from p53 dysfunction is a significant clinical problem. Although mutation can inhibit p53 function, >60% of p53 mutants retain normal function according to literature reports. Therefore, we examined the status of p53 in cisplatin-resistant

实验方案

Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.

了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具,可让所有人掌握基因组编辑。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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