生物来源
Escherichia coli (RRI)
质量水平
等级
Molecular Biology
表单
buffered aqueous solution
运输
dry ice
储存温度
−20°C
SMILES字符串
[P](=O)(OC2C(OC(C2)N)CO[P](=O)(OC3C(OC(C3)N)CO)O)(OCC1OC(CC1O)N)O
InChI
1S/C15H31N3O13P2/c16-13-1-7(20)11(28-13)5-25-32(21,22)31-9-3-15(18)29-12(9)6-26-33(23,24)30-8-2-14(17)27-10(8)4-19/h7-15,19-20H,1-6,16-18H2,(H,21,22)(H,23,24)
InChI key
AWBASQCACWFTGD-UHFFFAOYSA-N
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一般描述
来自大肠杆菌RRI的质粒DNA使得适当的宿主菌株具备了氨苄西林抗性和β-半乳糖苷酶补体缺陷。多克隆位点(MCS)位于β-半乳糖苷酶基因内。pUC8和9在MCS中有9个唯一位点,而pUC18和19有13个位点。
应用
来自大肠杆菌 RRI 的质粒 DNA已被用于聚合酶链式反应(PCR)。
来自大肠杆菌RRI的质粒DNA还被用于体外DNA转染研究。
生化/生理作用
这些质粒赋予适当的宿主菌株氨苄青霉素抗性和β-半乳糖苷酶补体缺陷。多克隆位点(MCS)位于β-半乳糖苷酶基因内;pUC8和9在MCS中有9个唯一位点,而pUC18和19有13个位点。
插入 MCS 的外源 DNA 消除了分解乳糖的能力。乳糖阳性,氨苄青霉素抗性菌落(含有质粒的宿主菌株)在含有氨苄青霉素和 X-Gal 的平板上形成蓝色菌落;乳糖阴性,氨苄青霉素抗性菌落(含有在 MCS 处插入外源 DNA 的质粒的宿主菌株)在该培养基上形成白色菌落。pUC 质粒中 MCS 区域的方向与相应的 M13 噬菌体的方向相似。
插入 MCS 的外源 DNA 消除了分解乳糖的能力。乳糖阳性,氨苄青霉素抗性菌落(含有质粒的宿主菌株)在含有氨苄青霉素和 X-Gal 的平板上形成蓝色菌落;乳糖阴性,氨苄青霉素抗性菌落(含有在 MCS 处插入外源 DNA 的质粒的宿主菌株)在该培养基上形成白色菌落。pUC 质粒中 MCS 区域的方向与相应的 M13 噬菌体的方向相似。
原理
插入 MCS 的外源 DNA 打断了 β-半乳糖苷酶基因,并消除了分解乳糖的能力。乳糖阳性,氨苄青霉素抗性菌落(含有质粒的宿主菌株)在含有氨苄青霉素和 X-Gal 的平板上形成蓝色菌落;乳糖阴性,氨苄青霉素抗性菌落(含有在 MCS 处插入外源 DNA 的质粒的宿主菌株)在该培养基上形成白色菌落。
其他说明
pUC18 质粒 DNA,10 μg,浓度约为 0.5 mg/ml,在含 1 mM EDTA 的 10 mM Tris-HCl,pH 8.0 中提供。
储存分类代码
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
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