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ESPCAS9PRO

Sigma-Aldrich

eSpCas9蛋白

from Streptococcus pyogenes with mutations conferring enhanced specificity, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

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别名:
eCas9, eSpCas9, eSpCas9 1.1, eSpyCas9, 增强特异性Cas9
NACRES:
NA.51

重组

expressed in E. coli

质量水平

300

检测方案

≥95% (SDS-PAGE)

形式

lyophilized powder

包装

pkg of 1 kit (3 components)

应用

CRISPR

运输

ambient

储存温度

−20°C

相关类别

一般描述

来自化脓链球菌的重组eSpCas9蛋白（~160 KD）是一种可用于基因组工程改造实验的即用型试剂。当与靶标特异性的向导RNA结合时，eSpCas9可作为靶向核酸酶，用于细胞培养物的转染和通过单细胞胚胎注射加速基因修饰动物的发育。

应用

功能基因组学/靶标验证/基因组编辑

特点和优势

  • 与野生型Cas9相比具有增强的特异性
  • 高活性
  • 可立即用于注射/转染

包装

50 μg 装
250 μg 装

组分

每个试剂盒包含：
  • 一瓶eSpCas9重组蛋白
  • 一瓶1×稀释缓冲液，1 mL
  • 一瓶含有甘油的1 mL无核酸酶水

原理

新型工程化的eSpCas9可对已经建立的CRISPR系统进行有效的靶向基因编辑，并具有更低脱靶效应的优势。 如Slaymaker等人所述，SpCas9染色体结合基序中的点突变提供了更高的中靶保真度，且不会导致切割效率的损失。

重悬

冻干的化脓性链球菌eSpCas9蛋白应重悬于所提供的重构溶液中，以获得相应浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。

其他说明

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法律信息

CRISPR 使用许可协议
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

仅试剂盒组分

产品编号
说明
  • Enhanced specificity Cas9-NLS from Streptococcus pyogenes, expressed in Escherichia coli
  • Dilution buffer for Cas9 proteins
  • Reconstitution solution for Cas9 proteins

储存分类代码

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

法规信息

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CRISPR off-target analysis in genetically engineered rats and mice
Keith R. Anderson, et al
Nature Methods (2018)
Evan R Stark-Dykema et al.
Scientific reports, 12(1), 8554-8554 (2022-05-21)
Mammalian sex chromosomes are enriched for large, nearly-identical, palindromic sequences harboring genes expressed predominately in testicular germ cells. Discerning if individual palindrome-associated gene families are essential for male reproduction is difficult due to challenges in disrupting all copies of a
CRISPR/Cas9 Endonuclease-Mediated Mouse Genome Editing of One-Cell and/or Two-Cell Embryos by Electroporation, and the Use of Rad51 to Enhance Knock-In Allele Homozygosity via Interhomolog Repair Mechanism.
Garza, et al.
Methods in Molecular Biology, 2631, 253-266 (2023)
Vasin Dumrongprechachan et al.
eLife, 11 (2022-10-15)
Mammalian axonal development begins in embryonic stages and continues postnatally. After birth, axonal proteomic landscape changes rapidly, coordinated by transcription, protein turnover, and post-translational modifications. Comprehensive profiling of axonal proteomes across neurodevelopment is limited, with most studies lacking cell-type and
Rationally engineered Cas9 nucleases with improved specificity.
Slaymaker, I.M., et al.
Science, 351, 84-88 (2015)
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Validating CRISPR/Cas9-mediated Gene Editing

After you have performed a CRISPR experiment it is important to determine which gRNAs performed successfully editing. There are many ways to validate CRISPR gene editing experiments. A quick and easy way to check for cutting is by using the Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit.

实验方案

Recombinant eSpCas9 Protein for RNP-Based Genome Editing

The CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) system was discovered in bacteria, where it functions as an adaptive immune system against invading viral and plasmid DNA.

Ribonucleoprotein (RNP) Protocols Using Synthetic sgRNAs and Cas9 proteins

Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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