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关于此项目
NACRES:
NA.43
UNSPSC Code:
12352203
Technique(s):
western blot: 1:2000-1:4000 using for detection of amino-terminal FLAG-BAP fusion protein in an E. coli crude cell lysate
Species reactivity:
-
Application:
WB
Citations:
4
antibody product type
secondary antibodies
Quality Level
description
buffered aqueous solution
form
lyophilized solid
technique(s)
western blot: 1:2000-1:4000 using for detection of amino-terminal FLAG-BAP fusion protein in an E. coli crude cell lysate
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
使用纯化的 FLAG 融合蛋白作为免疫原在兔中开发抗 FLAG 抗体。使用固定在琼脂糖上的蛋白 A 纯化完整的抗血清,以提供抗血清的 IgG 部分,并与辣根过氧化物酶结合。
抗-FLAG 识别位于 FLAG 融合蛋白上的 FLAG 表位。该抗体通过免疫印迹与 N-末端、N-末端-Met 和 C-末端 FLAG 融合蛋白反应。FLAG 肽(N-Asp-Tyr-Lys-Asp-AspAsp-Asp-Lys-C) 抑制特异性染色。偶联物的应用包括蛋白质印迹和 ELISA。
表位标签提供的方法可定位各种类型细胞中的基因产物、研究蛋白和蛋白复合物的拓扑结构、识别相关蛋白,并在没有蛋白特异性抗体时对新鉴定、丰度低或免疫原性低的蛋白进行表征。FLAG 肽序列标签可以在 N-端、前面有甲硫氨酸残基的 N-端、C-端或在靶蛋白的内部位置进行。FLAG也可以与其他标签一起使用。短FLAG标签或序列及其高亲水性倾向于降低干扰蛋白表达、蛋白水解成熟、抗原性和功能的可能性。N-端FLAG 肽序列含有独特的肠激酶切割位点,使其可以从纯化的融合蛋白中完全去除。已有报道,C-端FLAG 肽的Cu2+离子,可从融合蛋白催化切割。在大鼠和小鼠 Mg2+β 依赖性蛋白 b-磷酸酶以及人类细胞和牛细胞酶中发现了一种序列模体,其八个氨基酸残基中有五个与 FLAG 肽相同。
抗-FLAG 识别位于 FLAG 融合蛋白上的 FLAG 表位。该抗体通过免疫印迹与 N-末端、N-末端-Met 和 C-末端 FLAG 融合蛋白反应。FLAG 肽(N-Asp-Tyr-Lys-Asp-AspAsp-Asp-Lys-C) 抑制特异性染色。偶联物的应用包括蛋白质印迹和 ELISA。
表位标签提供的方法可定位各种类型细胞中的基因产物、研究蛋白和蛋白复合物的拓扑结构、识别相关蛋白,并在没有蛋白特异性抗体时对新鉴定、丰度低或免疫原性低的蛋白进行表征。FLAG 肽序列标签可以在 N-端、前面有甲硫氨酸残基的 N-端、C-端或在靶蛋白的内部位置进行。FLAG也可以与其他标签一起使用。短FLAG标签或序列及其高亲水性倾向于降低干扰蛋白表达、蛋白水解成熟、抗原性和功能的可能性。N-端FLAG 肽序列含有独特的肠激酶切割位点,使其可以从纯化的融合蛋白中完全去除。已有报道,C-端FLAG 肽的Cu2+离子,可从融合蛋白催化切割。在大鼠和小鼠 Mg2+β 依赖性蛋白 b-磷酸酶以及人类细胞和牛细胞酶中发现了一种序列模体,其八个氨基酸残基中有五个与 FLAG 肽相同。
Immunogen
纯化的 FLAG 融合蛋白
Application
对于免疫印迹,建议使用 1:2000 – 1:4000 作为初始稀释度
浏览我们有关其他应用的参考文献,请访问 FLAG® 文献 FLAG® 文献页面。
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Physical form
冻干粉末
Legal Information
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
仅供研究使用。不可用于药物、家庭或其他用途。有关危险和安全处理方法的信息,请参阅安全数据说明书。
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signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 3 - Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
存储类别
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 3
法规信息
低风险生物材料
常规特殊物品
此项目有
R G Chubet et al.
BioTechniques, 20(1), 136-141 (1996-01-01)
The FLAG peptide, AspTyrLysAspAspAspAspLys, has been used as an epitope tag in a variety of cell types. The modification of the cytomegalovirus (CMV) promoter containing vector, pCMV5, to create two transient expression vectors designed for secretion and intracellular expression of
A S Robeva et al.
Biochemical pharmacology, 51(4), 545-555 (1996-02-23)
An expression plasmid for mammalian cells (CLDN10B) has been modified to add nucleotides encoding hexahistidine and the FLAG peptide (H/F) to cDNAs. The new mammalian expression plasmid has been named pDoubleTrouble (pDT). The plasmid and a recombinant baculovirus were used
D P Humphreys et al.
Protein engineering, 12(2), 179-184 (1999-04-09)
The peptide sequence (N)DKTH(C) was investigated as a site for efficient, specific cleavage of a fusion protein by cupric ions using a humanised gamma1 Fab' as a model protein. The native upper hinge (N)DKTH(C) sequence was mutated to create a
