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重组
expressed in E. coli
质量水平
包装
pkg of (6 vials per kit)
应用
CRISPR
genome editing
selection
kanamycin
运输
dry ice
储存温度
−20°C
一般描述
CRISPR集成试剂盒提供了将BstNI限制性酶切位点整合至人类KRAS基因座所必需的基本基因组编辑试剂。该试剂盒可作为工具,在短的寡核苷酸供体的帮助下评估细胞系在CRISPR效应双链断裂时整合新序列的能力。该试剂盒所能够获得的整合效率可帮助进行合理设计各种细胞系中的基因组编辑实验。
应用
CRISPR/Cas9可用于引入或“敲入”新的DNA序列。常见的修饰包括引入SNP、小标签、loxP或更大片段,例如荧光蛋白。这些修饰是通过引入靶向DSB来进行的,从而显著增强了靶向整合效率(Choulika等,1995)。靶向整合(基因敲入)通过同源直接修复(HDR)进行(Bibikova等,2002)。为了能够通过HDR进行基因编辑,含有所需序列的DNA“供体”或修复模板必须与gRNA和Cas9一起递送给细胞。
特点和优势
- CRISPR整合检测提供了经验证的CRISPR系统,其可对DNA进行高效切割,同时提供标准化的寡核苷酸供体,以在各种细胞系中对同源性相关的修复频率进行研究
- CRISPR辅助整合可提高目标诱变率,而无需进行抗生素选择
- 该试剂盒所能够获得的整合效率可帮助进行合理设计各种细胞系中的基因组编辑实验
组分
每个试剂盒包含:
一小瓶gRNA质粒-KRAS
一小瓶Cas9 GFP质粒
一小瓶供体寡核苷酸(120个碱基)
一小瓶正向PCR引物
一小瓶反向PCR引物
一小瓶基因组DNA对照
一小瓶gRNA质粒-KRAS
一小瓶Cas9 GFP质粒
一小瓶供体寡核苷酸(120个碱基)
一小瓶正向PCR引物
一小瓶反向PCR引物
一小瓶基因组DNA对照
法律信息
WGK
nwg
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
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