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关于此项目
化学文摘社编号:
eCl@ss:
32160410
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-668-6
MDL number:
Specific activity:
≥225 units/mg protein (biuret, using pyrogallol)
Biological source:
horseradish
Concentration:
≥1.0 mg/mL
biological source
horseradish
Quality Segment
type
Type X
form
ammonium sulfate suspension
specific activity
≥225 units/mg protein (biuret, using pyrogallol)
mol wt
~44 kDa
concentration
≥1.0 mg/mL
absorbance ratio
RZ 2.5-3.5
storage temp.
2-8°C
SMILES string
[O+H2]O[O-]
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI key
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
General description
辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
Application
在评估前半抗原的皮肤致敏潜力时,使用了来自Sigma的酶。它也已用于显示过氧化物酶(PO)活性及其热稳定性与游离Ca2+离子的可用性相关。
辣根过氧化物酶(HRP)分离自辣根中(Amoracia rusticana)。 它可用于生物化学应用,如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子(例如蛋白质)的可检测性。 产品P6140已用于检测低密度脂蛋白(LDL)。
Biochem/physiol Actions
HRP易与过氧化氢(H2O2)结合,所得[HRP-H2O2]配合物可氧化各种氢供体。最佳pH为6.0-6.5,酶在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合,包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标签,β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此,它是最理想的标签。而且,糖基化使其非特异性结合较低。它还用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。已发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸、以及Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+、铅2+ 等离子可抑制其酶活性。
当与底物一起孵育时,辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色荧光或发光衍生物,从而进行定量。 研究已显示辣根过氧化物酶可略微降低cydAB突变体中的抑制水平。
Physical form
结晶混悬液溶于3.2 M (NH4)2SO4溶液,包含磷酸钾缓冲液中的,pH 6.0
Preparation Note
如果需要,可以用水稀释混悬液。
Analysis Note
RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
初步研究表明存在两种碱性和无酸性同工酶
Other Notes
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下,在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。
有关过氧化物酶的更多信息,请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。
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Danger
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pcodes
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Resp. Sens. 1
存储类别
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
