蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

Name: 蛋白酶 K 来源于<I>林伯氏白色念球菌</I>
Brand: SIGMA

≥3.0 unit/mg solid, lyophilized powder

别名:

肽链内切酶

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About This Item

CAS Number:

39450-01-6

EC 号:

3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)

EC 号:

254-457-8

MDL编号:

MFCD00132129

UNSPSC代码:

12352204

eCl@ss:

32160410

NACRES:

NA.54

生物来源

maize
microbial (T.album
T. ALBUM)
plant seeds (barley)
soybean
yeast

质量水平

200

表单

lyophilized powder

比活

≥3.0 unit/mg solid

分子量

28.93 kDa

组成

Protein, ≥15% biuret

技术

DNA extraction: suitable

应用

diagnostic assay manufacturing

储存温度

−20°C

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应用

在分离 DNA 和 RNA 期间，蛋白酶 K 可用于核酸酶的蛋白水解失活。它用于清除与阳离子蛋白质（如溶菌酶和核糖核酸酶 A）结合的内毒素。它还可用于分离肝脏、酵母和绿豆线粒体，并用于确定酶在膜上的定位。此外，它用于处理石蜡包埋的组织切片，有助于暴露抗原结合位点和用于消化脑组织样品中蛋白质。产品 P8044 冻干粉有售。

在分离DNA和RNA的过程中，对核酸酶的蛋白水解失活起作用。

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

该酶（来自 Sigma）可用于在从解脂耶氏酵母中提取泛醌之前，降解复合物 I（NADH：泛醌氧化还原酶）。它也可用于检测蛋白酶 k 对极腐霉的影响。在沉淀浆液中，它也可使水解的肽键的种类最大化，而酶本身不会自溶产生氨基酸。

生化/生理作用

蛋白酶 K 对天然蛋白质活性高。它具有广泛的特异性，即使在自然状态下也会降解许多蛋白质。它主要裂解与脂肪族羧基相邻的肽键，以及带有受阻 α-氨基的芳香族氨基酸。最佳 pH 值为 7.5-9.0，等电点为 8.9。激活需要 Ca²⁺（1-5mM）。蛋白酶 K 被二异丙基氟磷酸盐（DFIP）和苯基甲磺酰氟（PMSF）抑制。

蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。