标签
FLAG® tagged
表单
buffered aqueous solution
菌种筛选
kanamycin
哺乳动物细胞筛选
puromycin
复制起点
pUC (500 copies)
肽切割
TEV
no cleavage
肽标签位置
C-terminal
N-terminal
启动子
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
运输
ambient
储存温度
−20°C
一般描述
分子克隆常得益于用于表达的载体优化。
该试剂包可让您将FLAG表位标签放置在目标基因的N端或C端(插入MCS,在CMV启动子的转录控制下)并进行比较,带或不带TEV(烟草蚀刻病毒)蛋白酶切割位点。TEV位点使生产后从蛋白质上去除FLAG标记成为可能。比较这四种配置可让您评估如何最好地从哺乳动物细胞中表达和检测目标基因。如果需要,我们还提供许多其他功能标签和切割网站。该质粒集已设计为与一系列克隆技术兼容。多个克隆位点包含一系列标准的常用克隆限制位点。利用这些位点,可以用DNA连接酶的标准克隆方法插入基因。也可以使用其他方法,如连接酶独立克隆(LIC) Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt,因为所有质粒都基于相同的主干,可用相同的方法克隆到所有目录载体中。
多克隆位点说明:MCS中有几个重要的位点。这些位点包括NcoI位点、XbaI位点、BsgI和BseRI位点。NcoI位点包含一个起始密码子,它位于Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子放在这个位置时,实现了基因的最佳定位。如果这不是必需的,您希望使用下游位点进行基因克隆,可以通过用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。XbaI位点包含一个终止密码子。该终止密码子位于BsgI和BseRI位点的特定位置,BsgI和BseRI位点位于相邻下游。当BseRI或BsgI切割质粒时,会从XbaI位点的终止密码子产生TA悬点,与在相同位点上切割的所有肽标签质粒兼容。BseRI和BsgI位点是非回文,并从结合位点上切割一定数量的碱基。每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时,我们总是将起始密码子和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和末端与NcoI和XbaI不兼容,我们将序列扩展到最近的外部位点,但保持起始和终止密码子位置一致。
转录终止:这些质粒包含哺乳动物细菌和噬菌体(T7)表达的三个替代转录终止子。这意味着只需要改变启动子就可以改变你正在使用的表达系统。我们出售多个启动子,可用于上述每一系统。每个终止子的存在不会减少替代系统中的表达。
该试剂包可让您将FLAG表位标签放置在目标基因的N端或C端(插入MCS,在CMV启动子的转录控制下)并进行比较,带或不带TEV(烟草蚀刻病毒)蛋白酶切割位点。TEV位点使生产后从蛋白质上去除FLAG标记成为可能。比较这四种配置可让您评估如何最好地从哺乳动物细胞中表达和检测目标基因。如果需要,我们还提供许多其他功能标签和切割网站。该质粒集已设计为与一系列克隆技术兼容。多个克隆位点包含一系列标准的常用克隆限制位点。利用这些位点,可以用DNA连接酶的标准克隆方法插入基因。也可以使用其他方法,如连接酶独立克隆(LIC) Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt,因为所有质粒都基于相同的主干,可用相同的方法克隆到所有目录载体中。
多克隆位点说明:MCS中有几个重要的位点。这些位点包括NcoI位点、XbaI位点、BsgI和BseRI位点。NcoI位点包含一个起始密码子,它位于Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子放在这个位置时,实现了基因的最佳定位。如果这不是必需的,您希望使用下游位点进行基因克隆,可以通过用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。XbaI位点包含一个终止密码子。该终止密码子位于BsgI和BseRI位点的特定位置,BsgI和BseRI位点位于相邻下游。当BseRI或BsgI切割质粒时,会从XbaI位点的终止密码子产生TA悬点,与在相同位点上切割的所有肽标签质粒兼容。BseRI和BsgI位点是非回文,并从结合位点上切割一定数量的碱基。每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时,我们总是将起始密码子和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和末端与NcoI和XbaI不兼容,我们将序列扩展到最近的外部位点,但保持起始和终止密码子位置一致。
转录终止:这些质粒包含哺乳动物细菌和噬菌体(T7)表达的三个替代转录终止子。这意味着只需要改变启动子就可以改变你正在使用的表达系统。我们出售多个启动子,可用于上述每一系统。每个终止子的存在不会减少替代系统中的表达。
分析说明
欲查看本品的分析证书,请访问 www.oxgene.com
其他说明
欲查看本品的序列信息,请访问产品页面
法律信息
这些质粒的销售不受延展权限制,并且可用于制造商业产品。然而,质粒本身(或衍生物)不能出售。
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
试剂盒组分也可单独购买
产品编号
说明
化学品安全说明书
- OGS3213PSF-CMV-PURO-NH2-FLAG® - N-TERMINAL FLAG® TAG MAMMALIAN PLASMID, plasmid vector for molecular cloning化学品安全说明书
- OGS1124PSF-CMV-PURO-COOH-TEV-FLAG® - C-TERMINAL FLAG® TAG MAMMALIAN PLASMID, plasmid vector for molecular cloning化学品安全说明书
- OGS3423PSF-CMV-PURO-COOH-FLAG® - C-TERMINAL FLAG® TAG MAMMALIAN PLASMID, plasmid vector for molecular cloning化学品安全说明书
- OGS1123PSF-CMV-PURO-NH2-FLAG®-TEV - N-TERMINAL FLAG® TAG MAMMALIAN PLASMID, plasmid vector for molecular cloning化学品安全说明书
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
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